【流式】贝克曼库尔特 CytoFLEX 紫光侧向角散射光：替代 PMT 前向散射光检测或利用荧光通道进行细胞外囊泡检测的备选方案

在过去的十年中，对于分泌型膜囊泡的研究呈现快 速增长趋势，这些分泌型膜囊泡统称为“细胞外囊 泡”(EV)。在癌症病理学、神经病学、心血管 、自身免疫和风湿性疾病 ，以及疟疾等病毒性感 染的研究中，均发现涉及 EV 的释放。出于临床和 治疗上存在的可能性，对 EV 的研究越来越受到医学 和科学机构的重视。但实际上，对于 EV 的鉴定与分 类却困难重重。尽管显微镜等各个领域都在不断进步， 解决了不少初期研究面临的障碍，但流式细胞技术仍 然是对亚微米级细胞衍生颗粒进行表征检测的主要手 段。目前，分析亚微米级颗粒的主要障碍在于：散射 光是否准确准确反应了微颗粒的粒径分布。最初，人 们用全血作为标准品对仪器阈值进行设定，然而，这 种方式无法对小于 3um 的细胞进行测定。最近，流 式细胞仪技术进一步发展，已经能够区分 <400nm 至 1um 范围内的细胞群了。此次独立研究将对一些 技术进行评估和比较。通过对大多数硬件的调整，以 实现对FSC 参数的加强和优化，此次研究还对贝克 曼库尔特的CytoFLEX 紫光 SSC 检测小颗粒这种新 颖方法的检测效果进行评估。根据米氏散射理论，用 较短波长可以实现对较小颗粒的检测，研究人员认为 紫光 SSC 能够提供相似的检测结果。（作者：Vasilis Toxavidis、Virginia Camacho 和 John Tigges；所属单位：BIDMC, CLS 932 – Flow Cytometry Core Facility, 3 Blackfan Circle, Boston, MA 02115）