马铃薯病毒一步法多重RT-PCR检测技术的构建

根据马铃薯病毒 PVX、PVY、PVA、PLRV 的 CP 基因序列设计 4 对特异性引物, 通过对试剂浓度和反应条件进行优化, 建立了能够同步检测 PVX、PVY、PVA、PLRV 的一步法多重RT-PCR 检测方法。该方法对 PVX、PVY、PVA、PLRV 扩增出的靶带大小分别为 732、422、132和 336 bp, 凝胶电泳易辨别区分。病毒 RNA 最低检测限度为 7.8 pg/μL, 对 PVM、PVS、AMV、TMV 及 PSTVd 的扩增为阴性。研究结果表明, 该方法特异、灵敏, 比两步法多重 RT-PCR 检测更加快速、简便, 提高了检测效率, 降低检测成本, 为马铃薯病毒的高效检测提供了有效手段。