荧光定量PCR方法检测畜肉食品中猪源性成分

近年来, 为了确定食物的真实性, 已经开发了很多对动物源性成分鉴别的方法及标准, 其中尤以应用 PCR 技术及荧光探针 PCR 技术进行核酸 DNA分子标记的研究最为快速、灵敏[1-5]。 目前, 针对猪源性成分检测的方法及标准较多，现行标准主要有 GB/T 21101-2007《动物源性饲料中猪源性成分定性检测方法 PCR 方法》和 SN/T 2051-2008《食品、化妆品和饲料中牛羊猪源性成分检测方法 实时 PCR 法》。二者在应用时均存在较大缺陷, 前者主要是应用普通 PCR 技术对饲料中猪源性成分进行检测, 费时费力, 逐步被荧光定量PCR方法取代; 后者将技术内容以试剂盒(大连 TaKaRa公司)形式推出, 相关信息包括引物序列等核心内容 均不对外公布, 不符合标准的制定原则, 更不利于在实际工作中的应用和推广。针对此现状, 迫切需求建立新的检测方法及标准来满足实际需要。 本研究首次针对猪线粒体 12S rRNA gene 特异序列设计引物及探针, 旨在建立快速、简便、灵敏、特异的畜肉食品中猪源性成分的鉴别检测方法及方法标准, 为动物源性成分检测提供技术依据。