锤子
实验四 淀粉水解糖的制备 一、实验目的 学习并掌握淀粉水解糖的酶法制备工艺。 二、实验原理 根据淀粉的性质及采用的水解催化剂的不同,可将淀粉的水解方法分为酸解法、酸酶结合法和酶解法。酶解法是指利用淀粉酶将淀粉水解为葡萄糖的过程。酶解法制葡萄糖可分为两步,第一步是利用α-淀粉酶将淀粉液化为糊精及低聚糖,使淀粉的可溶性增加,这个过程称为液化;第二步是利用糖化酶将糊精或低聚糖进一步水解,转变为葡萄糖的过程,在生产上称为糖化。淀粉的液化和糖化都是在酶的作用下进行的,故也称为双酶水解法。 酶解法制葡萄糖的优点有:(1)酶水解过程条件比较温和,不需耐高温、高压和耐酸的设备,便于就地取材。(2)由于酶具有专一性,水解副反应少,所得糖液纯度高,淀粉的转化率高。(3)可在较高淀粉乳浓度下水解。酸解法一般使用10~12°Bé(含淀粉18%~20%);酶解法用20~23°Bé(含淀粉34%~40%),而且可以采用粗原料。(4)用酶解法制得的糖液颜色浅、较纯净、无苦味、质量高,有利于糖液的精制。 三、实验材料 1.材料:可溶性淀粉 α-淀粉酶 糖化酶 CaCl2 2.仪器:恒温水浴锅 四、实验步骤 1.淀粉的液化 称取淀粉2 g,加水至100 mL,滴加NaOH调节pH为6.0~6.5,加0.11g CaCl2使Ca2+浓度达到0.01mol/L,加入50 mL实验一中枯草芽孢杆菌T2产生的α-淀粉酶粗酶液,在85~90℃下保温30min,碘液检测显棕色时,迅速升温至100℃,加热5min使α-淀粉酶失活,即可转入糖化阶段。 2.淀粉的糖化 将上述液化液降温至60℃,调整pH为4.0~4.5,按100u/g淀粉的量加入实验二中黑曲霉产生的糖化酶粗酶液,保温48h左右,分别在0.5h、1h、1.5h、2h、2.5h、3h、6h、12h、24h、48h取反应液加入碘液5ml,观察颜色变化。 五、实验结果 接近碘液颜色时表明糖化完毕。
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