上海闪谱-蛋白纯化系统-组氨酸标签蛋白纯化介质的合成及其分离纯化

蛋白质的分离纯化是发展蛋白组学，研究蛋白质结构功能与应用的前提和基础。 本文研发了一种基于亲和性离子液体（AIL）/离子液体（IL）的组氨酸标签蛋白的纯化体系，经螯合金属离子（Cu2+、Zn2+、Ni2+）后应用于从大肠杆菌细胞裂解物中纯化组氨酸标签增强型绿色荧光蛋白。 结果表明：Cu2+-AIL/IL 对目标蛋白的亲和性能最高， 为 62%， 然而含有较多的杂蛋白成分；Zn2+-AIL/IL 的亲和效率约为 51%， 且纯化后目标蛋白的纯度高达90%，Ni2+-AIL/IL 的亲和能力最弱。 进一步将 Zn2+-AIL/IL 体系应用于直接纯化大肠杆菌中表达的组氨酸标签青霉素结合蛋白的细菌裂解液，所得目标蛋白纯度高达 95%。 这种方法为新型组氨酸标签蛋白纯化介质，从基础 研究拓展到产业化应用提供了理论依据，并可望将此类新型亲和介质应用到其它蛋白质的分离纯化。