同轴通道DNA提取和微流控PCR快速灵敏检测大肠埃希菌O157:H7

在本研究中，提出并验证了一种快速灵敏的检测大肠杆菌O157：H7的方法，该方法使用基于同轴通道的DNA提取和微流控PCR。首先将磁性二氧化硅微珠泵到同轴通道中，通过施加多环高梯度磁场使其在同轴通道中更均匀地捕获。大肠杆菌O157：H7细胞用裂解缓冲液裂解释放DNA后，用改进的同轴通道有效地提取DNA，然后用乙醇洗涤去除残余蛋白，用小体积去离子水洗脱，得到纯化和浓缩的DNA。最后，用微流控PCR对获得的DNA进行扩增和鉴定。所提出的细菌检测方法在使用大体积(10mL)细菌样品时，能够检测出低至12CFU/mL的大肠杆菌O157：H7，添加牛奶样品中大肠杆菌O157：H7的回收率在97.4%~100.6%之间。这种提出的细菌检测方法显示了从大量样品中检测较低浓度的大肠杆菌O157：H7的巨大潜力。