手把手教你如何选择合适的液相色谱柱

当研发或调整一个液相色谱（LC）分 离时，我们面临的最大的挑战就是使色 谱峰点来回移动，避免出现色谱峰重 合。该过程涉及改变分离的选择性，α。 正如在最近的一系列“液相色谱故障排 查”文章中所述（1-3），完成这一调整 有很多种方法，其中一种方法就是更换 色谱柱。当更换色谱柱时，我们的目标 通常是找到一个等效柱或正交柱。所谓 的“等效”，是指能够产生与原色谱柱类 似的分离满意度的另一个色谱柱（也就 是选择性非常类似），例如当将第二色 谱柱来源指定为常规方法的备选方案 时。所谓的“正交”，是指能够产生完全 迥异于原色谱柱所产生分离的另一个 色谱柱。更换为正交柱将导致至少一些 色谱峰对的α出现显著差异（也就是说， 迥然不同的选择性），通常可以观察到 洗脱顺序逆转或是重合的色谱峰对被 分解。研究人员通常需要使用正交柱， 作为一种检查潜在色谱峰的方法、一种 分离已知色谱峰重叠的方法或是一种 用于初步检查样品整体复杂性的筛选 工具。简单通过更换成一个正交柱就能 满足所有分离要求的情况很少见，相 反，在最终的方法能够满意解决所有所 关心的色谱峰问题之前，一个期望就是 需要对色谱条件（例如，溶剂类型、有 机百分比、pH 或温度）进行额外调整。