定量western blot ：为什么需要验证抗体

验证抗体对于WB结果的一致性和重复性是至关重要的，即确认抗体能特异性识别感兴趣的蛋白，抗体与其他蛋白的交叉反应性情况。在您的论文提交给期刊发表之前，经常需要验证抗体的特异性，但并非所有人都花时间进行验证。或者很多人都认为他们使用抗体进行了免疫共沉淀验证，因而不需要再通过蛋白质印迹进行验证。然而，抗体与抗原的亲和性高度依赖于实验条件，因此，验证您的试验方法中的条件适用于抗体与抗原的结合是十分重要的。在《JBC》杂志中关于抗体验证信息如下： ? 定义所有使用的抗体的来源和种类，包括目录/批号。 ? 描述如何产生新抗体，包括表位/抗原的制备和纯化。 ? 描述支持抗体特异性的数据，包括翻译后修饰或新表位。 ? 证明对抗原进行遗传或其他分子修饰后免疫反应性降低。