细胞不贴壁，可能是这些原因？

细胞的传代最重要的是胰酶处理时间：消化不够细胞本身就是成团的；若胰酶处理太久，容易造成细胞膜蛋白损伤，使细胞贴壁不紧，显微镜下观察立体感不强，严重的时候甚至会造成细胞死亡。 缺少贴壁因子：血清中含有促贴壁因子，而无血清培养基工艺中由于缺少这种促贴壁因子，细胞的贴壁效果会下降很多。 支原体或细菌的污染。 培养液配置、储存不当，如pH值过碱，Gln量太少等原因。 复苏的细胞本身状态不好，已经老化，失去贴附性。 接种细胞数目太少，无法分泌足够的细胞外基质。 复苏时处理速度太慢，复苏过程不当。