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锤子
细胞的传代最重要的是胰酶处理时间:消化不够细胞本身就是成团的;若胰酶处理太久,容易造成细胞膜蛋白损伤,使细胞贴壁不紧,显微镜下观察立体感不强,严重的时候甚至会造成细胞死亡。 缺少贴壁因子:血清中含有促贴壁因子,而无血清培养基工艺中由于缺少这种促贴壁因子,细胞的贴壁效果会下降很多。 支原体或细菌的污染。 培养液配置、储存不当,如pH值过碱,Gln量太少等原因。 复苏的细胞本身状态不好,已经老化,失去贴附性。 接种细胞数目太少,无法分泌足够的细胞外基质。 复苏时处理速度太慢,复苏过程不当。
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