锤子
实时荧光定量PCR技术实现了PCR从定性到定量的飞跃,具有特异性更强、有效解决PCR污染问题、自动化程度高等特点,成为核酸分子定量的标准方法。在做荧光定量PCR实验时建议使用这些耗材:96孔光学反应板配合光学膜,0.2ml光学八联反应管配合光学膜,0.2ml光学八联反应管配合平盖的光学八联管盖等。在做荧光定量PCR实验时有一些好的方法分享给大家,例如在使用单管或者8连管做实验时,如果在样本数量不多的时候,建议在样品加热块(TRAY)上对称的安放样品,并且先放在第6列或者第7列,然后逐渐向两边放置。这样热盖压下来的时候不至于发生倾斜,每个反应管的受力和受热都比较均匀,提高了孔与孔之间的数据精密性。又例如使用96孔板做实验的时候,建议使用光学膜代替盖子来密封反应孔。封膜的方法要先沿着96孔板的纵向压膜,然后在横向,最后在沿着板的边缘按压密封。Pilot5-8T冻干机应用示例(荧光PCR冻干): 1.探针、底物、引物原料要求确定。 2.冻干溶液配方开发,采用正交法或响应曲面法进行辅料筛选。 3.选择适合的包材和模具。 4.设计冻干曲线配合辅料筛选。 5.确定配方及工艺。 6.稳定性测试。 7.根据稳定性测试结果修正工艺或配方。 8.整个环节注意环境、设备、人员的结合。
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