液相色谱柱串联使用技术简介

在液相分析中，通常是通过被分析物质在固定相与流动相之间由于溶解度差异而在两者间重新进行分配来达到对其的分离目的，但在实际工作中，尤其是在做中药、药代以及生体样品中，我们经常会遇到一些极其难以分离的物质，这些物质在溶解度上没有太大差异，所以依靠传统的单一色谱柱很难将这些物质分开，同时也就为色谱工作者的工作带来了极大的不便。 鉴于这种情况的普遍存在，日本资生堂的色谱工作者们依靠资生堂液相色谱柱在采用了包被技术后优越的性能，开发出了色谱柱串联使用技术，成功的解决了这一困扰色谱界多年的大难题。 色谱柱串联使用技术适用于溶解度无明显差异但在电荷上有明显差异的难分离物质，通过将一根SCX（阳离子交换）短柱与一根MGⅡC18长柱的串联使用就可以简单达到将其分离的目的，有电荷差异的被分离物质进入色谱柱串联系统后，带有正电荷的物质（通常是碱性物质）会由于SCX短柱的离子交换作用而被保留在SCX短柱中，而带负电荷的物质（通常为酸性物质）与中性物质则会毫无阻碍的通过SCX短柱直接进入C18长柱中，从而使带正电荷的物质与带负电荷与中性物质成功分离；然后由于MGⅡC18长柱中疏水性基团间的相互作用而对中性物质有强保留作用，但对带负电荷物质无强保留作用，这样带负电荷物质与中性物质也很简单被分开了。如果为了让峰形更加舒展，各峰间拉的更开阔，资生堂建议在阳离子交换短柱与C18长柱前接一根NH2短柱（NH2可与阴离子发生交换作用），进行三根串联，也可以使带负电荷的酸性物质与中性物质达到更好的分离效果。 资生堂提出的色谱柱串联使用技术在实际操作中得到了肯定，由于其扩散很小，所以峰形不会出现变宽的现象，而且操作简单，使用方便，分离效果远远优于传统方法，不久的将来，一定会在液相色谱、液-质联用工作中得到极为广泛的应用。