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锤子
MF色谱柱分为C1、Ph-1和C8、SCX四种固定相 1、对药物的保持强度顺序:C1> Ph-1 > C8/SCX:碱性物质。 2、安定性:在缓冲液(无有机溶剂)条件下最安定。 3、在考虑是否能用MF柱作直接进样分析时(即是否既能将蛋白与药物分开,又能将药物保持适当),常根据C18柱的分析条件和结果进行判断。一般至少要将C18所用有机溶剂减20%。比如C18柱少于20%的有机溶剂才能保持住高酸性化合物,建议用100mmol KH2PO4+K2HPO4缓冲液分析。MF柱可以用保持中等的Ph-1,如保持不住,则改用MF C8(或开始即用MF C8)。 相反,疏水性强的化合物,即使C18柱用80%的有机溶剂,MF柱也不能使用减20%后的60%的有机溶剂。因为MF柱的有机溶剂使用量不能高于20%,否则蛋白变性。此时用MF柱可能造成药物峰出峰很慢(起码比C18慢)。 4、建议移动相: 缓冲液:100mmol KH2PO4+K2HPO4/有机溶剂:CH3CN或IPA、THF,Ph2.0—7.5 5、样品进样前要用0.2μm的过滤膜过滤。 6、个别有苯环的化合物,Ph-1的保持可能比C8强。
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