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锤子
在优化纯化过程时,腺相关病毒(AAV)载体会面临多种应力因素:缓冲盐、pH值和离子强度都会影响其稳定性和产量,并会降低AAV的感染性。用于缓冲液置换的传统方法,例如透析和离心装置,都是劳动密集型的,置换结果一致性难以控制,并且难以高通量管理。Big Tuna是一个高通量的自动缓冲液置换系统,以实现统一的样品处理和高度过程控制,这是手动方法无法实现的。 在每个新的过程缓冲液中都应该对AAV的稳定性进行表征。然而,由于相关分析方法比较困难,稳定性研究很少进行。功能分析,如转染或感染性分析,需要花几天时间进行昂贵且敏感的实验操作。电子显微镜和其他结构表征工具的处理通量很低,需要熟练的操作员。这些都不足以有效地对工艺开发过程中所有缓冲液的稳定性进行筛选。 Uncle是一个多模式稳定性分析平台,有3种检测方法:全光谱荧光、静态光散射(SLS)和动态光散射(DLS),可以快速分析病毒的热稳定性。
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