全新UHPLC 技术在药物分析中的应用

2017/08/11   下载量: 6

方案摘要

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应用领域 制药/生物制药
检测样本 植物油脂和提取物
检测项目 含量测定>色谱法
参考标准 快速分析 UHPLC 中药指纹图谱 蛋白质 Vanquish

高效液相色谱已有近五十年的发展历史,期间色谱分离时间缩短了好几倍,使用的色谱填料粒度越来越小,如Accucore Vanquish UHPLC 色谱柱使用1.5 微米粒径的表面多孔实心核增强技术的固定相。理论上色谱柱的最小塔板高度为2 dp,受各种因素影响,实际的最小塔板高度约为3~3.5 dp。最佳流动相线速度与填料粒径dp 成反比关系,填料粒径越小,最佳线速度越高,最佳流速范围越宽,越适合快速分离分析,如配合使用系统压力脉动更低、检测器灵敏度更高的Vanquish UHPLC,可实现几十秒梯度时间的超快速分离。

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配置单
方案详情

     在常规HPLC 分析中,为了获得较高的分离度,往往需要使用更长的色谱柱和分析时间,并且在一定程度上牺牲检测灵敏度(色谱峰随保留时间延长而展宽)。根据范氏曲线(如图1)[1],当使用小粒径色谱固定相时,如将粒径为5 μm、柱长为L 的色谱柱换成1.7 μm 粒径相同长度的色谱柱,分离效率可增加3 倍。这意味着可以使用粒径1.7 μm 、柱长为1/3 L 的色谱柱获得粒径为5 μm、柱长为L 的色谱柱同样的柱效,从而极大的缩短分析时间。

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