全新Vanquish Core高效液相色谱系统用于氨基酸分析——在线针内衍生紫外检测和非衍生电雾式检测方法比较

2021/06/17   下载量： 3 次

方案摘要

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应用领域 制药
检测样本 生物药品原料
检测项目 含量测定
参考标准 国标

氨基酸是构成人体所需蛋白质的基本物质，是一类含有氨基和羧基的有机化合物。大部分氨基酸通常紫外吸收较弱，直接使用紫外方法检测干扰较大，灵敏度低。故通常需要通过合适的衍生试剂经衍生化增加生色团后，再使用紫外检测以提高其检测灵敏度。目前用于氨基酸衍生化反应的方法和试剂很多，主要分为柱前和柱后衍生，柱前衍生又有离线和在线衍生。衍生化试剂主要有异硫氰酸苯酯（PITC）、氨基甲酸酯（AQC）、邻苯二甲醛（OPA）、芴甲基氯甲酸甲酯（FMOC）和二硝基氟苯（DNFB）等[1-3]，不同的衍生化试剂在反应原理、效率及稳定性等方面不尽相同。

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本文在赛默飞全新Vanquish Core液相色谱平台上，结合OPA&FMOC衍生试剂和Vanquish Core用户自定义进样功能实现了在线针内衍生氨基酸分析，同时结合赛默飞特色的电雾式检测器和Hypercarb多孔石墨化碳色谱柱，实现了无需衍生的直接分析氨基酸方法。前者实现了在线衍生自动化，同时提升了衍生程序编辑效率，后者可以实现无需衍生直接分析，大大简化了前处理步骤。两种方法在灵敏度方面基本相当，但在重现性方面，非衍生-电雾式检测方法体现出较大的优势，为相关制药及食品等行业客户在氨基酸检测方面提供了新的思路。


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文献贡献者

赛默飞色谱与质谱
钻石会员 丨 第23年
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