LCMS-9030用于牛血清白蛋白的鉴定研究

2022/03/14   下载量: 1

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应用领域 制药/生物制药
检测样本 预防类生物药品
检测项目 其他>方法开发
参考标准

本文采用岛津LCMS-9030飞行时间高分辨液质联用仪对牛血清白蛋白(BSA)进行鉴定研究,并结合岛津LabSolutions和pFind软件对BSA酶解肽段进行匹配打分。结果显示,在胰蛋白酶酶切的情况下,使用两种计算软件对BSA二级结构确认的匹配度分别为82.4%和85.7%。利用Byonic软件对肽段上的修饰基团进行解析,结果显示,除固定修饰乙酰胺化外,BSA仅存在少量的N-脱酰胺(Deamidated)等可变修饰。该方法快速、准确,分析精确度高,为蛋白类样品的肽质谱图分析提供参考。

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本文采用自下而上(Bottom-up)的研究策略,对BSA进行了鉴定研究。BSA样品经LCMS-9030分析,经两种软件计算,PSM匹配得分均大于80%,即使是在复杂蛋白组成体系中,PSM也能获得68%或以上的匹配结果。同时,对BSA翻译后修饰进行了研究,除固定修饰乙酰胺化外,BSA仅存在少量的N-脱酰胺(Deamidated)等可变修饰,可变修饰比例低于3%。该方法简便,准确,适合蛋白组学或蛋白类药物的鉴别研究。


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