分析血清中7种类固醇激素的临床研究

2019/08/06   下载量： 10 次

方案摘要

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应用领域 医疗/卫生
检测样本 全血/血清/血浆
检测项目
参考标准 睾酮，雄烯二酮，17-OHP，DHEAS，皮质 醇，11-脱氧皮质醇，21-脱氧皮质醇，SPE， LC-MS/MS，Xevo TQ-S micro，自动化

1)色谱方法具有出色的分析选择性， 可以分离同分异构体 2)利用多孔板配置实现高通量的LC-MS/MS分析 3)睾酮、雄烯二酮、17-OHP、DHEAS和皮质醇的分析结果与EQA质谱法平均值具有良好的一致性

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应用优势

1)色谱方法具有出色的分析选择性， 可以分离同分异构体

2)利用多孔板配置实现高通量的LC-MS/MS分析

3)睾酮、雄烯二酮、17-OHP、DHEAS和皮质醇的分析结果与EQA质谱法平均值具有良好的一致性


简介

类固醇激素是一大类小分子，在代谢过程中发挥着非常重要的作用，例如性别特征调节、血压调节和炎症反应调节等。参与类固醇生物合成的某些酶类 在这些代谢过程中非常关键。通过测定合成途径中的类固醇激素，可以监测这些酶是否出现功能异常。若使用免疫分析法测定这些类固醇激素，由于抗 体试剂会与结构相似的类固醇激素以及合成途径的衍生物发生交叉反应，因此分析极易受到干扰。而使用液相色谱-串联质谱法(LC-MS/MS)测定这些类固醇激素可以获得极高的灵敏度、准确度和精密度。

本应用纪要介绍了一种分析睾酮、雄烯二酮、17-羟基孕酮(17-OHP)、脱氢表 雄酮硫酸盐(DHEAS)、皮质醇、11-脱氧皮质醇和21-脱氧皮质醇的临床研究方法，该方法使用Oasis PRiME HLB µElution板从血清中富集纯化目标分析物 (工作流程已采用Tecan Freedom EVO 100/4液体处理器实现了自动化)，然后使用配备ACQUITY UPLC HSS T3 VanGuard保护柱和ACQUITY UPLC HSS T3色谱柱的ACQUITY UPLC I-Class系统进行色谱分离，最后在Xevo TQ-S micro质谱仪(图1)上进行检测。此外，本研究还通过分析睾酮、雄烯二酮、 17-OHP、DHEAS和皮质醇的室间质量评估(EQA)样品评估了该方法的偏差， 以此判断该方法是否适合在临床研究中用于类固醇分析。


结论

本研究使用Xevo TQ-S micro开发了一种高灵敏度和高选择性分析血清样品中的睾酮、雄烯二酮、17-OHP、DHEAS、皮质醇、11-脱氧皮质醇和21-脱氧皮 质醇的分析方法。

Xevo TQ-S micro为该方法提供了足够的分析灵敏度，仅使用100 µL样品即可测定低浓度的睾酮、雄烯二酮、17-OHP、DHEAS、皮质醇、11-脱氧皮质醇 和21-脱氧皮质醇。该方法在校准范围内表现出良好的精密度。EQA样品的分析结果表明，该方法分析睾酮、雄烯二酮、17-OHP、DHEAS和皮质醇的结果与EQA LC-MS/MS平均值相比，具有良好的一致性。利用Tecan文件转换 器和MassLynx LIMS Interface，可以将方法自动化的优势与液体处理器的样品追踪功能相结合，从而改进实验室工作流程并减少样品处理工作量。


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文献贡献者

沃特世科技（上海）有限公司(Waters)
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