天然产物分离
中药中发挥药效物质基础是中药进入体内的化合物,中药化学成分的研究需要对中药中天然产物进行分离和结构鉴定。而且中药中天然产物成分及含量也存在地区差异,药材质量鉴定只从形态上难以满足,因此需要从化学成分基础上加以明确并为建立药材质量标准提供科学依据。中药中某些天然产物进行分离和结构鉴定也为基于天然产物优势结构骨架或单元的药物发现提供物质基础。
EYELA产品---天然产物分离案例
首先将一定质量的药材粉末装入一圆底烧瓶中、加入一定质量乙醇、回流提取2 h,过滤、回流提取两次合并滤液经EYELA旋转蒸发仪(水浴温度40 ℃,真空度20 hPa)浓缩得到浸膏,回收得到的溶剂乙醇重复利用。
将浸膏上样至大孔树脂色谱柱上,依次经过水、(30%-50%)乙醇水溶液洗脱,洗脱液经EYELA旋转蒸发仪浓缩(水浴温度40 ℃,真空度20 hPa)得到浸膏并上样至吸附硅胶色谱柱上,洗脱液洗脱得到含不同组分的硅胶柱段,将一硅胶柱段用醇溶剂洗脱,得到洗脱液经过旋蒸浓缩,并将该浓缩物溶解上样至C18硅胶柱上,醇溶剂洗脱得到含目标组分的洗脱液。
冷冻干燥
使用5-10倍体积纯化水稀释该洗脱液置于表面皿中,-20 ℃下预冻2 h,在冷阱温度为-45 ℃、真空度10 Pa下冻干(EYELA FDU-1200)至样品质量不发生变化时停止冻干依次关闭真空泵、制冷机,得到冻干后的样品。
EYELA浓缩及冻干设备在该中药天然产物分离上发挥重要作用,同时提供可靠的浓缩、冻干手段,为后续中药天然产物结构鉴定提供保障。
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