近日,国家市场监督管理总局、国家标准化管理委员会联合发布186项国家标准。 其中GB/T 38578-2020 《水产源致敏性蛋白快速检测 毛细管电泳法》于2020年3月1日正式生效实施。该标准由中国标准化研究院归口上报及执行,主管部门为国家市场监督管理总局。主要起草单位为中国标准化研究院 、绿城农科检测技术公司 、浙江工商大学 、北京工商大学 、集美大学 、湖南农业大学 、温州大学等单位。
该标准规定了水生动物源水产食品原料典型致敏性蛋白含量的高效毛细管电泳快速测定的原理、试剂或材料、仪器设备、测定步骤、结果计算。适用于甲壳类水生动物源原肌球蛋白和精氨酸激酶和鱼类水生动物源小清蛋白含量的快速检测。高效毛细管电泳能够快速检测水产源致敏性蛋白,即引起的异常或过强的免疫反应的致敏性蛋白物质。该项标准的颁布为过敏原致敏物质快速筛查提供了有效的检测技术手段。
近年来,水产品及其制品引起的过敏问题日益严重,微量水产品过敏原即可引起严重的过敏反应。目前,水产品过敏原常用检测以ELISA法和PCR法为代表,但这两种方法存在成本高、操作繁琐、对水产制品检测准确度低的缺点。而高效毛细管电泳技术的应用提供出一种结果准确、操作简便、成本低的水产品过敏原检测方法该方法简便快速、灵敏度高,重现性好,可用于测定甲壳类水产品中原肌球蛋白的含量。该项标准的颁布提供了一种快速、准确的水产品过敏原检测方法,对于标示水产制品中过敏原含量,具有降低水产品过敏发病率的重要意义。
高效毛细管电泳技术可以在较短的分析时间(一般4-6分钟)内完成目标分析,一次分析实现多种目标物的定性和定量测定,实现较高的工作效率。同时,试剂消耗量也较低,3-5mL即可,使用较低,分析操作简单,样品前处理便捷。LUMEX研发的CAPEL系列毛细管电泳仪经过20多年的发展,已经在不同领域的获得大量的试剂应用经验,特别是在食品和饮料分析领域。这些经验使我们能够对食品和饮料中重要成分的测定提供最有效和可靠的应用方案。独特的专利恒温水冷设计和SPC流动电位控制技术提高了重现性,降低了毛细管污染造成的迁移时间变化和结果的不稳定,提高了分析精准度。
依据GB/T 38578-2020标准方法,分析致敏性蛋白毛细管分析检测波长设定是214 nm,进样方式为压力进样(0.5 psi,5s),25 ℃;鱼小清蛋白和虾原肌球蛋白的最佳分离条件为分离电压15 kV,运行缓冲液为25 mmol/L硼酸-硼砂缓冲液;虾精氨酸激酶的最佳分离条件为分离电压18 kV,运行缓冲液为25 mmol/L硼酸-硼砂缓冲液。
高效毛细管电泳仪以高压电场为驱动力,以毛细管为分离通道,依据样品中各组分之间淌度和分配行为的差异而实现分离的一类液相分离。通过致敏性蛋白在毛细管中的不同迁移行为,对被测样品中致敏性蛋白的迁移时间进行检测,实现对致敏性蛋白的定性检测。毛细管电泳中致敏性蛋白的响应强度与致敏性蛋白的含量呈线性关系,将响应强度与致敏性蛋白含量建立标准曲线,以致敏性蛋白的谱峰面积代表过敏原的实际量,通过标准曲线计算得到被测水生动物源水产原料致敏性蛋白的含量。
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CAPEL毛细管电泳快速测定大麻及大麻原料中14种大麻素
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