方案摘要
方案下载| 应用领域 | 生物产业 |
| 检测样本 | 其他 |
| 检测项目 | |
| 参考标准 | 无 |
为了确定蛋白质样品的纯度和均一性，提出了两种基于毛细管的方法-毛细管凝胶电泳（CGE）和毛细管等电聚焦（CIEF）。前者在分子量不同的蛋白质被分解时应用。后者适用于几乎相同的分子量，但不同的净电荷的蛋白质异构体。
为了确定蛋白质样品的纯度和均一性，提出了两种基于毛细管的方法-毛细管凝胶电泳（CGE）和毛细管等电聚焦（CIEF）。前者在分子量不同的蛋白质被分解时应用。后者适用于几乎相同的分子量，但不同的净电荷的蛋白质异构体。
在CGE中，毛细管用缓冲聚合物溶液填充。在分析之前，蛋白质样品通过加入还原剂或加热来变性。快速冷却后，注入样品，施加高电压，蛋白质开始通过聚合物溶液迁移。类似于平板中的SDS凝胶电泳，由于毛细管聚合物溶液的筛分效应，蛋白质根据其分子质量在毛细管中分离。蛋白质的分子量差异不大，只有4%。
在CIEF中，整个毛细管填充有基于聚合物的两性电解质样品的混合物。在第一阶段，通过等电聚焦，施加高电压，pH梯度形成使得样品中蛋白质其中它们的净电荷等于零）按照分子量的不同聚焦在一条狭窄区域中。在这个阶段结束时，毛细管中几乎没有任何运动，电流大约为零。在第二阶段，再次施加高电压，聚焦区开始向探测器点移动。根据选定的两性电解质，蛋白质和蛋白质异构体相差不大，只有0.04π单位可以解决和量化。
这两种方法都可以通过线性回归来确定未知蛋白质的纯度和均一性。
文献贡献者
CAPEL毛细管电泳测定大麻及大麻原料中14种大麻素
依据2020年版药典使用 LUMEX毛细管电泳Capel分析佐米曲普坦手性异构体
精对苯二甲酸中4-羧基苯甲醛和对甲苯酸的测定（LUEMX毛细管电泳法）
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