方案摘要
方案下载应用领域 | 制药/生物制药 |
检测样本 | 中药材和饮片 |
检测项目 | 含量测定>色谱法 |
参考标准 | 中国药典 |
本文实验将使用 4.6 × 150 mm,5 µm 色谱柱进行人参分析的传统方法转移到了 Agilent Poroshell 120 EC-C18,3.0 mm × 100 mm,2.7 µm 色谱柱上。在线速度相同的情况下,所需梯度时间从 100 多分钟降至大约 70 分钟,如果提高流速,还可以将分析时间进一步 降至 25 分钟以下。在本示例中,高流速条件下压力超过会 400 bar,因此需要使用 600 bar 的仪器。如果采用 Agilent Poroshell 120 EC-C18 或 Poroshell 120 SB-C18 3.0 mm × 50 mm 色谱柱,梯度时间还可进一步缩短。最短的时间为 11 分钟,对关键化合物(人参皂苷 Rg1 和 Re)的分离度为 1.57。另外,由于色谱柱使用 2 µm 滤头,因此,在样品制备过程中新方法无需要更改。压力仍低于 400 bar,因此该方法可以在任何 HPLC 仪器上运行。
前言
亚洲人参原产于中国和韩国,数个世纪以来应用于医学的不同系统中。关于人参的治疗报道不计其数,这种药材用于保健和增强免疫系统。人参的传统方法和现代应用包括:增强大病初愈者的健康,增加健康以及耐力,改善精神和身体机能,治疗勃起障碍,丙型肝炎,以及妇女绝经综合症;降低血糖,并且控制血压。亚洲人参的根含有的活性化学物质名为人参皂苷,是人参药用价值的所在。[1]
在中国药典中,采用高效液相色谱方法测定人参中三种主要人参皂苷Rg1,Re 和Rb1 的含量[2]。最初的方法使用传统的4.6 mm ×150 mm,5 μm 色谱柱,使用长达100 分钟的梯度洗脱。因此,有必要建立一种快速的分析方法以增加分析通量并降低实验成本。在本研究中,将传统方法转移到安捷伦Poroshell 120 EC-C18 和Poroshell 120 SB-C18 色谱柱上。安捷伦Poroshell 120 2.7 μm色谱柱使用表面多孔材料填装,使其能实现快速分离,且性能类似于亚2 μm 全多孔材料。这种方法根据色谱柱的长度、内径以及样品大小进行比例转换。在较短的色谱柱上,仍然能保持原来的线速度。
结论
将人参中人参皂苷的分析方法成功的从传统的4.6 × 150 mm,5 μm 色谱柱转移到Poroshell 120 色谱柱上,大大节省了分析时间,同时也没有损失分离度。根据所需要的分析时间以及可用的高效液相色谱仪器选择最好的分析方法。相比于全多孔的亚2 μm填料填充的色谱柱,表面多孔的2.7 μm 颗粒填充的色谱柱显示出相似的性能,但是压力较低。由于压力较低,该方法可以在400 bar的仪器上运行。较高的流速在超高液相色谱仪上可以实现较快的分离,压力最高可达色谱柱的压力上限600 bar。
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