使用亲水相互作用色谱 (HILIC) 与 LC/MS/MS 分析胆碱代谢物

2018/08/16   下载量: 15

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应用领域 制药/生物制药
检测样本 原料药
检测项目 其他
参考标准 暂无

使用 Agilent InfinityLab Poroshell 120 HILIC-Z 和 Agilent InfinityLab Poroshell 120 HILIC-OH5 色谱柱分析胆碱及其代谢物。与 Poroshell 120 HILIC-OH5 相比,Poroshell 120 HILIC-Z 色谱柱可提供更好的峰形和略高的灵敏度,但是保留性能较弱。本文使用 Poroshell 120 HILIC-Z 色谱柱考察不同流动相添加剂的影响。结果发现,在流动相中添加 10 mmol/L 乙酸铵可以获得最佳峰形。

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使用 Agilent InfinityLab Poroshell 120 HILIC-Z 和 Agilent InfinityLab Poroshell 120 HILIC-OH5 色谱柱分析胆碱及其代谢物。与 Poroshell 120 HILIC-OH5 相比,Poroshell 120 HILIC-Z 色谱柱可提供更好的峰形和略高的灵敏度,但是保留性能较弱。本文使用 Poroshell 120 HILIC-Z 色谱柱考察不同流动相添加剂的影响。结果发现,在流动相中添加 10 mmol/L 乙酸铵可以获得最佳峰形。

前言

胆碱及其代谢物甜菜碱、乙酰胆碱和甘油磷酰胆碱属于小分子强极性季胺化合物,无法在反相色谱柱上保留。新开发的 HILIC 化学键合相采用表面多孔颗粒填料技术,是保留这类化合物的理想选择。在本应用简报中,使用 InfinityLab Poroshell 120 HILIC-OH5 和 Agilent InfinityLab Poroshell 120 HILIC-Z 化学键合相色谱柱对胆碱及其代谢物进行分离。使用 Poroshell 120 HILIC-Z 色谱柱考察不同流动相添加剂的影响。Agilent 6460 三重四极杆液质联用系统用于低浓度样品的检测。

 

结论
总体来说,在中性 pH 值条件下使用添加乙酸铵的流动相以及 InfinityLab Poroshell 120 HILIC-Z 色谱柱可以实现胆碱及其代谢物的最佳分离。对另一种不同的 HILIC 化学键合相(即 InfinityLab Poroshell 120 HILIC-OH5)也同样进行了分离性能的评估。甜菜碱的灵敏度在 HILIC-OH5 色谱柱上得到了提高,然而乙酰胆碱和胆碱的峰形和灵敏度在 HILIC-Z 色谱柱上更出色。

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