目前美洲出现了寨卡(Zika)病毒的爆发流行。2014年2月,智利发现了首例寨卡病毒感染者。2015年5月,巴西开始出现寨卡病毒感染,目前已有24个国家和地区有疫情报道,其中22个在美洲,欧洲多国也有报道,有蔓延全球之势。寨卡(Zika)病毒属于黄病毒科中之黄病毒属的RNA病毒,与乙型脑炎病毒、登革热病毒、西尼罗病毒近亲。若想深入研究该病毒,首先需要提取该病毒的核酸。本文将介绍一种快速提取该病毒核酸的方法, 为该病毒的研究,诊断,及疫苗的研究提供最有效的帮助。
寨卡病毒的主要载体伊蚊(Aedes mosquito)是世界体型最大的蚊子一种,存活在除南极洲之外的世界所有大洲。因此,寨卡病毒已经遍布南非、墨西哥、非洲、东南亚和太平洋岛国。
若想深入研究该病毒,首先需要提取该病毒的核酸。本文将介绍一种快速提取该病毒核酸的方法, 为该病毒的研究,诊断,及疫苗的研究提供最有效的帮助。
1. Kurabo核酸提取仪工作原理及优势:
病毒的核酸提取,传统的提取方法费时,费力,而使用市场上的很多其它品牌核酸提取仪也价格昂贵,得率低。KURABO公司的核酸提取纯化仪Quickgene 810和mini 80,第一大优势是其核心技术,KURABO专利设计的80um多孔膜, 此膜厚度是传统硅胶膜或树脂膜的1/12.5,比表面积更大,这种多孔膜可以选择性的吸附核酸,在低压下可完成高纯度的提取工作,所用时间更短,效率更高。第二大优势是该仪器无需额外的离心操作,优于任何其它品牌的核酸提取仪,避免了对样品的损伤,同时操作方便,快速,使得样品回收率更高。
2. 方法:
使用Kurabo Quickgeen系列的的RT-S2试剂盒,解决了用户繁琐的配置试剂及准备各种管子的麻烦,试剂盒已包括如下部分:LRT(裂解液), SRT(溶解液),WRT(清洗液), CRT(洗脱缓冲液),废液管,回收管,等。
3. 步骤:
操作过程非常简单,只需几个步骤,取2ml的微量管,加入150uL血清并按如下步骤进行:
将上述预处理样品转入Kurabo多孔膜过滤柱,放置到Quickgene 810或mini80 上,通过机器自动(Quickgene810)或手动 (mini80) 加如WRT缓冲液,并加压排液, 最后加入50uL CRT将RNA 洗脱到回收管,即得到RNA纯样品,4℃保存备用.
4. 结论:
通过上述方法可快速进行寨卡病毒的核酸提取,满足了下游进一步研究的需要。
关于天美:
天美(控股)有限公司(“天美(控股)”)从事表面科学、分析仪器、生命科学 设备及实验室仪器的设计、开发和制造及分销;为科研、教育、检测及生产提供完整可靠的解决方案。继2004年於新加坡SGX主板上市后,2011年12月 21日天美(控股)又在香港联交所主板上市(香港股票代码1298),成为中国分析仪器行业第一家在国际主要市场主板上市的公司。近年来天美(控股)积极 拓展国际市场,先后在新加坡、印度、澳门、印尼、泰国、越南、美国、英国、法国、德国、瑞士等多个国家设立分支机构。公司亦先后收购了法国 Froilabo公司、瑞士Precisa公司、美国IXRF公司、英国 Edinburgh Instruments公司等多家海外知名生产企业和布鲁克公司Scion气相和气质产品生产线,加强了公司产品的多样化。
更多详情欢迎访问天美(中国)官方网站:http://www.techcomp.cn
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