世界卫生组织及我国饮用水卫生标准(GB 5749-2006)均要求饮用水中隐孢子虫和贾第鞭毛虫(统称“两虫”)含量不超过1个/10 L。关于传统EPA 1623检测方法,水样的采集和浓缩需运用一次性滤囊,中间含复杂的洗脱程序,分离方法是免疫磁珠分离,一系列程序不仅前处理步骤繁杂,两虫回收率不到17%,同时要求操作者经验丰富,而且每年投入的检测成本过高,难以在水行业大范围的推广普及。
GE医疗生命科学部主张采用便携式真空加压膜过滤、丙酮溶解、密度梯度分离及免疫荧光检测相结合的方法,不仅可提高两虫的回收率,大大降低了检测成本,简化步骤和提高流程效率,还可解决由于费用昂贵而让两虫检测犯愁的问题,让水质安全的理念和行动更加普及。其实,这究竟是如何做到的呢?
简单说来,就是运用Whatman便携式加压真空过滤器,借助Nuclepore径迹蚀刻膜(1um)提高回收率,利用径迹蚀刻膜完全溶于丙酮,再通过Percoll密度梯度介质做离心分离,所得分离产物经GV050/2抽滤装置和Nuclepore径迹蚀刻膜抽滤并完成染色操作,最终利用荧光显微镜或DeltaVision Elite高分辨率显微镜观察“两虫“。这项方法有两大应用优势:一是便携式可换膜过滤装置替代一次性滤器,二是密度梯度分离法替代免疫磁珠分离法,均提高了两虫的回收率(~50%),同时大大降低了检测成本。
总而言之,这种运用Whatman加压真空过滤器、Nuclepore径迹蚀刻膜、Percoll细胞梯度分离介质及细胞成像的“两虫”检测新方法,不仅大幅提高回收率,降低数倍的成本,对更广泛层面地保障饮水安全和生活健康有利。
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