如何修炼成流式高手 -方案设计(上)

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我们时常会遇到,明明染色Marker都来自一篇文献,但是最后实验结果却变成“买家秀与卖家秀”。 


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产生这种现象的原因是什么?以及我们为什么要如何优化我们的染色方案呢?我们先看具体的例子。


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方案1与方案2,所选择的marker都完全一致,所选用的荧光素种类一样,但是搭配不一样。那么我们看看同一个样本,最后各个细胞亚群的结果一样吗?


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方案1与方案2CD4+CD25+ 的百分比接近(AC比较),可是CD8+CD69+的百分比却相差很多(CD比较)。


造成这种原因其实就是我们平时说到到spreading现象。


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Nguyen, Richard, et al. "Quantifying spillover spreading for comparing instrument performance and aiding in multicolor panel design." Cytometry Part A 83.3 (2013): 306-315.


如果要优化流式染色方案中,由spreading现象产生的分辨率降低,我们可以使用SWOFF方法。通过如下流程,就可以很快找出究竟是由于那个通道的配色不合理,导致分辨能力下降。


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在不同的检测平台,元件的光电转化效率会直接影响仪器总体分辨率。


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不仅如此,科技的进步带来的还有更小的spreading现象,这使得配色也更加的轻松,结果也更加的准确。


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你想知道如何检查自己的染色方案么?利用SWOFF的方法,可以帮您发现并且优化,使检测更加准确。点击下方阅读全文,获取SWOFF的详细步骤。 


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