二氧化碳培养箱所控制的二氧化碳浓度对细胞生长的影响:
CO2是细胞的代谢产物和生长的必需成分,与维持培养液的pH有关。在密闭瓶中,CO2浓度偏低,细胞容易生长;一般不能低于1%,否则有损细胞。
大多数细胞适于在pH7.2~pH7.4条件下生长,低于pH6.8或高于pH7.6对细胞有害,甚至退变或死亡。一般原代培养细胞对pH的变动耐受性差,永生性细胞系和恶性细胞对pH的变动耐力强。
总体上,细胞对酸性的耐受性较碱性更强,偏酸的条件比偏碱的环境对细胞生长有利。细胞在生长过程中,随细胞数量的增多和代谢活动的加强,不断释放CO2,使培养基变酸,pH发生变化。
因此,为了维持培养基pH值的恒定,多采用在培养液中加入碳酸盐等缓冲剂的方法。碳酸盐缓冲剂中的NaHCO3可供给CO2,但CO2易于逸出,故只适用于封闭式培养。
CO2浓度过高会使PH变低,培养基很容易变黄,细胞就回缩变圆了。过低了培养基变紫,细胞生长缓慢。若开放式培养还是置于含有5%CO2的气体环境中为宜。
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