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我们在培养细胞时观察细胞生长状态就会发现细胞受各种因素的影响，这些因素看似不起眼，若不注意就会导致细胞负伤惨重。那么，这些小细节究竟如何影响细胞生长，在培养细胞时我们又该如何避坑呢？今天带大家学习影响细胞生长的因素。
我们在用二氧化碳培养箱培养细胞时观察细胞生长状态就会发现细胞受各种因素的影响，这些因素看似不起眼，若不注意就会导致细胞负伤惨重。那么，这些小细节究竟如何影响细胞生长，在培养细胞时我们又该如何避坑呢？今天带大家学习影响细胞生长的因素。
1、细胞之间的接触程度
正常细胞（二倍体）存在贴壁接触抑制，长满后细胞生长停止，而肿瘤细胞等非正常细胞，接触抑制作用较弱，可生长至较高的细胞密度，但某些细胞过度生长，其损伤难以逆转，所以培养细胞时不建议细胞密度太高。
划重点：一般细胞汇合度达到 70-80% 即可传代，切忌长得太满。
2、细胞生长附着物
贴壁细胞在正常情况下都会贴壁，但一些细胞本身贴壁不牢或贴壁性差，这个时候包被附着物能够促进细胞的黏附，所以在培养一些特殊细胞时，需要对培养瓶/皿进行包被后使用。常用的基质有多聚赖氨酸（D 型、L 型）、明胶、胶原蛋白、细胞外基质混合物，培养时可根据需要自行选择。划重点：细胞贴壁差时可使用基质包被培养瓶/皿。
大多数细胞系在 pH7.4 左右时生长最好，而常规培养基的指示剂为酚红，所以多数情况下，我们所见的培养基都呈红色，但不同培养基的颜色会有差异，例如 DMEM 比 1640 颜色深一点。在培养细胞时，也可以根据培养基的颜色判断细胞状态，如随着细胞生长，培养基颜色会变浅变黄。
划重点：培养细胞时关注培养基颜色变化，发现异常及时处理。
3、培养温度
对于大部分人源细胞和温血动物细胞系来讲，比较适宜的培养温度是 37℃，因为这个温度接近体温，但为了安全可以再稍低一些，高于体温的温度要比低于体温的温度更易产生问题。对于禽类细胞，由于其体温较高，所以培养温度可以设置二氧化碳培养箱为 38.5℃左右。
划重点：培养细胞时保持温度稳定，不要长时间敞开培养箱的门，并且不要将培养器皿大量重叠堆放在培养箱中，避免空气不循环。
4、气相组分
大部分培养基适合于 95% 空气 5%CO2，但有部分培养基例外，如 L15 培养基适合于 100% 空气，CO2 会导致培养液 PH 降低（培养液变黄），严重影响细胞生长；若需要用 L15 培养基培养细胞，但没有 100% 空气培养箱时，可以拧紧瓶盖或换培养基（效果可能更好）培养。适用于 CO2 环境的培养基需保持培养瓶透气。
划重点：培养细胞时注意参照说明书选择培养基，并注意培养坏境。
文献贡献者
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