其他null检测 | 二氧化碳培养箱在胚胎干细胞复苏中的应用-上海喆图科学仪器有限公司

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干细胞研究的进展对于对抗疾病，尤其是癌症治疗具有重要意义。胚胎干细胞的复苏过程需要特别小心，以确保细胞活力和维持其未分化状态。二氧化碳培养箱的应用是确保细胞在从冷冻状态恢复到生长状态时能够在一个稳定且适宜的环境中进行。

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方案详情

干细胞研究的进展对于对抗疾病，尤其是癌症治疗具有重要意义。胚胎干细胞的复苏过程需要特别小心，以确保细胞活力和维持其未分化状态。二氧化碳培养箱的应用是确保细胞在从冷冻状态恢复到生长状态时能够在一个稳定且适宜的环境中进行。

应用步骤：

※准备工作

检查培养箱：确保二氧化碳培养箱预热至37°C，CO2浓度设定在5%；

准备材料：准备无菌的ES细胞培养基、解冻液（如含血清和DMSO的培养基）、无菌吸管、离心管、移液器、消毒的培养皿、细胞计数板等；

※从液氮中取出胚胎干细胞

穿戴个人防护装备：戴上手套和护目镜，确保安全；

快速解冻：将含有胚胎干细胞的冷冻管从液氮中取出，迅速放入37°C的水浴锅中进行快速解冻，注意不要让水进入冷冻管的封口部分；

※移液和清洗

转移细胞：将解冻后的细胞转移到含有预温（37°C）的解冻液的离心管中，轻轻混合；

离心：将离心管放入离心机中，以低速离心5-10分钟，弃去上清液；

清洗细胞：向离心管中加入预温的ES细胞培养基，轻轻混合后再次离心；

※ 细胞计数和稀释

细胞计数：使用细胞计数板对胚胎干细胞进行计数；

稀释：根据细胞计数结果，将细胞稀释到所需的浓度，通常在预温的ES细胞培养基中进行；

※接种到培养皿

预涂培养皿：在复苏之前，将培养皿用适合ES细胞生长的饲养层细胞或特定的基质蛋白（如Matrigel）预涂；

接种细胞：将稀释后的细胞悬液接种到预涂好的培养皿中；

放入培养箱：将接种好的培养皿放入二氧化碳培养箱中，确保细胞在适宜的环境中复苏。

在整个复苏过程中，二氧化碳培养箱提供了胚胎干细胞生长所需的恒定温度、二氧化碳浓度和相对湿度。正确的操作步骤和严格的无菌技术对于确保胚胎干细胞复苏的成功至关重要。复苏后的细胞应尽快进行培养，并避免长时间暴露在室温下。

文献贡献者

上海喆图科学仪器有限公司

白金会员丨第18年

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