通微课堂之导致色谱峰分叉的因素分析

2017/04/14   下载量: 14

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应用领域 制药/生物制药
检测样本 中药材和饮片
检测项目
参考标准 药典

采用EasySep®-1020液相色谱系统,配备UV检测器或ELSD检测器,测定方法准确、灵敏度高、重现性好,可以满足日常分析要求。

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高效液相色谱仪作为一种高精密分析科学仪器,如果使用过程中操作不当容易导致各种各样的问题,其中最常见的也是关注度较高的问题是峰形异常的问题。之前我们已经讲述过色谱峰前延、色谱峰拖尾等峰形异常问题的原因及解决方法,下面我们将着重讨论另外一种常见的峰形异常问题-色谱峰分叉,即出现双峰或肩峰,如下图所示:


  导致色谱峰分叉的因素有很多,我们来了解一下常见的几种情况:

1、保护柱被阻塞或污染:复杂的样品基质容易造成保护柱的阻塞或污染,进而产生色谱峰分叉的现象。

解决办法:取下保护柱再进行分析,如有必要可更换保护柱。

 

2、分析柱被阻塞或污染:色谱柱在开始使用时没问题,而使用一段时间后出现峰分叉的现象,很可能是由于色谱柱被阻塞或者污染引起。

解决办法:如果分析柱阻塞,一般入口被阻塞的可能性较大,建议更换筛板或更换色谱柱;若分析柱被强保留物质污染,根据污染物质的物化性质选择适当的清洗再生措施。

 

3、色谱柱填料塌陷:色谱柱通常都有其适用的pH、温度范围,例如硅胶基质填料的色谱柱pH耐受范围一般为2-8,推荐使用温度不超过40℃,若使用不当会造成色谱柱填料塌陷,从而导致色谱峰分叉。

解决办法:由于柱填料塌陷引起的色谱峰分叉很难修复,建议更换新的色谱柱。

 

4、溶剂效应:样品溶剂不溶于流动相。对于反相色谱,若使用100%有机溶剂或100%强溶剂,大体积进样时,将使色谱峰过早的洗脱出色谱柱,导致峰变形。

解决办法:改变样品溶剂。如果可能采取流动相作为样品溶剂。

 

5、接头连接不正确:如果连接柱子时选用的连接头不配套,柱子虽能固定住但管线与柱头仍有一定空间,涡流导致峰前延或分叉。

解决办法:换个配套的连接头。

 

6、样品过载:进样量超过柱容量时,尤其在使用小体积色谱柱时,也可能会出现峰分叉的现象。

解决办法:减小进样量

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