动物组织DNA的制备提取及应用

2018-11-06 13:10  下载量:1

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提取核酸的基本程序包括细胞破碎-解聚核蛋白并去除蛋白质-沉淀核酸并去除其它杂质三步。破碎细胞的方法很多,高等动植物材料常用液氮研磨法。 核蛋白利用DNA核蛋白在0.14mol/L Nacl盐溶液的溶解度很低的特点而实验其与RNA核蛋白分离,残存的RNA经 R Nase水解而去除。 蛋白质经蛋白酶水解,并经苯酚、Trichloromethane变性而分开。提纯过程中的DNA酶活性经低温操作并用SDS解聚或柠檬酸三钠和EDTA.Na2等螯合剂抑制。逐渐纯化的DNA经乙醇或异丙醇沉淀而收集,最终实现DNA分离纯化之目的。

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