考马斯亮蓝染色测定蛋白质含量

2016/07/18   下载量: 10

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应用领域 食品/农产品
检测样本 液体乳
检测项目 营养成分>蛋白质
参考标准 考马斯亮蓝

考马斯亮蓝(Coomassie Brilliant Blue)测定蛋白含量存在着两种不同颜色形式,红色和蓝色。此染料与蛋白质结合后颜色由红色形式转变蓝色形式,最大光吸收由465nm变成595nm。在一定蛋白质浓度范围内,蛋白质和染料结合符合比尔定律(Beer’s law),因此可以通过测定染料在595nm处吸收的增加量得到与其结合的蛋白质量。本法测定范围为10~100μg蛋白质。

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考马斯亮蓝染色测定蛋白质含量

 

一、实验原理

考马斯亮蓝(Coomassie Brilliant Blue)测定蛋白含量存在着两种不同颜色形式,红色和蓝色。此染料与蛋白质结合后颜色由红色形式转变蓝色形式,最大光吸收由465nm变成595nm。在一定蛋白质浓度范围内,蛋白质和染料结合符合比尔定律(Beer’s law),因此可以通过测定染料在595nm处吸收的增加量得到与其结合的蛋白质量。本法测定范围为10~100μg蛋白质。

由于该法简单、迅速、干扰物质少、重复性好、灵敏度高,现已广泛应用于蛋白质含量测定。

 

二、实验用品

(一)器材

    (1) 722分光光度计。

    (2) 微量进样器。

    (3) 移液管(0.1ml及5ml)。

   (4) 试管及试管架。  


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