方案摘要
方案下载| 应用领域 | 食品/农产品 |
| 检测样本 | 啤酒 |
| 检测项目 | 理化分析>4-甲基咪唑 |
| 参考标准 | 企业 |
焦糖色是我国允许使用的一种食用着色剂，应用广泛，涵盖食品、酿酒、制药等多个领域。 国际上通常按其生产工艺把焦糖色分为四类：Ⅰ普通焦糖；Ⅱ亚硫酸钾钠焦糖；Ⅲ氨焦糖；Ⅳ亚硫酸铵焦糖。我国GB 2760-2014《食品安全国家标准 食品添加剂使用标准》中规定啤酒中Ⅲ、Ⅳ类焦糖色使用限量为50g/L。
焦糖色是我国允许使用的一种食用着色剂，应用广泛，涵盖食品、酿酒、制药等多个领域。
国际上通常按其生产工艺把焦糖色分为四类：Ⅰ普通焦糖；Ⅱ亚硫酸钾钠焦糖；Ⅲ氨焦糖；Ⅳ亚硫酸铵焦糖。我国GB 2760-2014《食品安全国家标准 食品添加剂使用标准》中规定啤酒中Ⅲ、Ⅳ类焦糖色使用限量为50g/L。
Ⅲ、Ⅳ类焦糖色在生产过程中会产生一定量的有害物质4-甲基咪唑，GB 8817-2001《食品添加剂 焦糖色（亚硫酸铵法、氨法、普通法）》中规定，4-甲基咪唑在焦糖色中含量小于0.02%，然而啤酒并无相关卫生标准。
研究表明，4-甲基咪唑能导致动物长肿瘤，有可能给人体带来致癌风险，目前，4-甲基咪唑检测方法主要有分光光度法、色谱法和色谱-质谱联用法等。
国内对4-甲基咪唑的检测主要集中于焦糖色原料，其次是对其相关食品酱油和可乐，对啤酒中4-甲基咪唑含量测定鲜见报道。
本研究建立固相萃取-超高效液相色谱-串联质谱法测定啤酒中4-甲基咪唑含量，旨在为啤酒的安全性评价以及相关标准的制定提供技术支持。
一、实验仪器
氮吹仪 液质联用仪，高速离心机、电子天平、漩涡振荡器、超声波清洗器
二、实验试剂
4-甲基咪唑标准品，4-MEI-D5（含量为98.7%），乙腈、甲醇、甲酸（纯度≥98%）均为色谱纯，氨水（分析纯），盐酸（优级纯），水为超纯水。其他试剂均为分析纯。
三、标准溶液的配置
4-甲基咪唑标准储备液的配置：称取4-MEI 6.29mg（精确至0.0001g），用水溶解后转移至25ml容量瓶中，加水定容配置成质量浓度为250μg/ml的标准储备液，于4℃条件下保存。精密量取上述储备液适量，加水制成每1ml含1.0μg的标准使用液，用于标准曲线的配置。
4-MEI-D5标准储备液的配置：称取4-MEI-D5 9.38mg（精确至0.0001g）用水溶解后转移至25ml容量瓶中，加水定容，配置成质量浓度为370μg/ml的标准储备液，于4℃条件下保存。精密量取上述储备液适量，加水制成1ml含0.5μg的对照内标使用液。
四、样品处理
1提取：将啤酒倒入烧杯中超声10min除尽热氧化碳，取约5.0g（精确至0.01g）于100ml容量瓶中，加入水至刻度，混匀。10000rpm离心5 min，取上清液备用。
2净化：移取约1.00ml提取液加入1.8ml水，加入100μl 0.02mol/L盐酸溶液，加入100μl内标使用液，混匀后倾入已活化的固相萃取小柱中，待液体全部流出后，用3ml水、3ml甲醇淋洗小柱，用3ml含5%氨水的甲醇溶液洗脱，收集洗脱液。
四、浓缩
收集洗脱液置于45℃水浴氮吹浓缩至干，残渣用1.00ml水溶解，过0.22μm滤膜后，待测。
五、检测
文献贡献者
使用喷雾干燥技术在制备姜油树脂微胶囊的工艺研究
使用喷雾干燥技术制备三七皂苷微球的工艺参数研究
利用喷雾干燥技术制备麦饭石微胶囊的工艺方法研究
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