酿酒糟中饲用酵母菌的分离与鉴定

2019/01/03   下载量: 7

方案摘要

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应用领域 生物产业
检测样本 生物发酵
检测项目 理化分析>其他
参考标准 企业

生态制剂是根据微生态理论选用动物体内正常定植的微生物菌种和促进物质 经过特殊工艺制成的,具有调节、维持或补充动物肠道微生态平衡,通过增强肠道 内有害微生物的抑制作用或增强非特异性免疫功能来预防疾病,可以提高饲料转化 率和促进动物生长的一类药物或饲料添加剂。

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配置单
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001 217喷雾干燥机斜面图.jpg


一、实验材料

猪场肥猪新鲜猪粪及酿酒糟

 

二、主要设备及仪器

PCR扩增仪美国、高速低温离心机、浓度测定仪、超纯水系统、超净工作台;

恒温摇床、恒温振荡器、台式离心机、电热恒温水浴锅、恒温烘箱、恒温培养箱;

恒温磁力搅拌器、电子天平、计算机成像系统、医用高压灭菌锅、格兰仕微波炉;

稳压稳流电泳仪、超低温冰箱、PH计。

 

三、缓冲液和常用试剂的配置

   1裂解液

   2醋酸钾

   3醋酸钠

   4TE缓冲液

   5TAE储备液

   6琼脂糖凝胶电泳上样缓冲液

   7EB贮存液

四、培养基

1LB培养基:胰蛋白胨

2牛肉膏蛋白胨培养基:牛肉膏

3马丁氏培养基:葡萄糖

4马铃薯培养基:马铃薯

5麦芽汁培养基葡萄糖

6WL营养培养基

 

五、酵母菌的分离与纯化

 A分离:采用稀释平板分离法,称取待测样品10g左右,放入装有无菌水90ml并加入玻璃珠的离心管中,置于摇床震荡20min,使微生物细胞分散,静置。即成10-1稀释液;再用1支无菌吸管吸取10-1稀释液1ml移入装有9ml无菌水的试管中,吹吸3次,让稀释液充分混合,即成10-2稀释液;再换1支无菌吸管吸取10-2稀释液1ml移入装有9ml无菌水的试管中,即成10-3稀释液。同理,制成10-4、10-5、10-6稀释液。取合适倍数的稀释液1ml加入到孟加拉红培养基中,静置30分钟后倒置放于28℃恒温培养箱中,培养三天。

B纯化培养:划线纯化法。灭菌PDA培养基,倒平板,挑取单菌落划线,28℃倒置培养三天,如此工作重复三次,以得到纯菌体。

 

六、酵母菌的鉴定

从猪粪和酒糟中共分离八株酵母菌,经鉴定共有种酵母菌,它们分别是皱褶假丝酵母、酿酒酵母、一东方伊萨酵母、团假丝酵母、热带假丝酵母、毛抱子菌属。从猪粪中分离两株酵母,分别是热带假丝酵母菌和毛抱子菌。这些分离出的酵母菌,除毛抱子菌外,其他都可以作为饲料酵母使用。

 

七、酵母菌发酵液的喷雾干燥。

 


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