方案摘要
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一、 简介 β兴奋剂是一种人和兽医作为治疗哮喘的药物。在牲畜中超剂量使用可使脂肪组织转化为肌肉组织,由于能够显著改善脂肪率和生产效率,特别是以瘦肉精为代表的β兴奋剂往往被滥用于畜牧养殖生产中,以此来增加瘦肉型猪的产量,严重威胁着人民群众的食品安全。近年来已经有克伦特罗或其他β兴奋剂中毒的病例报道。近来又有一些非法使用莱克多巴胺来替代克伦特罗作为饲料添加,并存在滥用现象。 二、 适用范围 本法是采用竞争性酶联免疫反应来测定尿液、血清、肝脏、水、饲料和肌肉中莱克多巴胺(瘦肉精)含量的检测。 三、 原理 其主要原理是:吸附在孔内的莱克多巴胺药物抗体与标准品或样品中药物竞争性与药物抗体相结合,未与药物抗体相结合的标准品或样品被洗涤去除后,只剩下与微孔内药物相结合的抗体,其再与加入的酶标记的结合物相结合,酶底物在酶作用下产生蓝色产物,该产物在450nm波长下产生较强吸光性。450nm吸光度与样品中药物含量成反比。 四、试剂盒标准配置 五、试剂盒储存 本试剂盒应储存于2-8℃的冰箱中。96孔板条在使用前,应始终储存于密封的口袋内。不同批号的溶液和微孔条不能混合使用。微孔板条干燥密封,并和其它所有试剂在4℃保存,这是长期储备的有效保证。存放有效期应为出厂后12个月。 六、试剂准备 洗液:用去离子水2升溶解所提供的磷酸盐固体 七、标样和样品准备 1.尿样标样准备 在测定尿样时,根据检测程序,在相应的孔内分别加入50uL的标准液。 尿样样品准备 50uL尿样可直接加入微孔进行检测。 2.饲料标样准备 测定时,检测程序,在相应的孔内分别加入50uL每一种标准液(0,1,2,5,10ng/mL)。 饲料样品准备 3.水样标样准备 水样品准备 无需准备,直接加50uL水样进行检测 稀释因子 1 八、药物检测程序:(孵育时间1.5小时) 九、计算结果: 1) 用标准物浓度为横坐标,450nm波长的吸光度为纵坐标在对数坐标纸上作标准曲线。以样品在相同波长的平均吸光度在标准曲线上找出相应的样品浓度。 2) 也可以使阴性对照标准(0ng/mL)吸光度值为100,而其它标准品或样品所测得吸光度值除以阴性对照标准(0ng/mL)吸光度值再乘以100:[标准品或样品所测得吸光度/阴性对照标准(0ng/mL)吸光度]*100]=%吸光度值。 3) 用所得的百分比(%吸光度值)作纵坐标,而用标准物浓度为横坐标,在对数坐标纸上作标准曲线。以样品所得百分数在标准曲线上找出相应的样品浓度。 十、测定技术指标: 样品需要量:50uL 灵敏度:1ng/mL 标准曲线范围:1-10ng/mL 准确性(回收率):100±10% 十一、交叉反应活性:
微波辅助分子内酯交换法合成环收缩红霉素A衍生物
超声与微波协同作用对转谷氨酰胺酶交联的乳清蛋白结构和功能特性的影响
微波辅助合成的新型类固醇希夫碱化学传感器用于检测水介质中的Al3+。
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