方案摘要
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PS-OBG用作尺寸排除色谱(size exclusion chromatography,又称凝胶渗透,gel permeation chromatography)测量大分子分子量时的标准样品。 首先介绍尺寸排除色谱(SEC/GPC)的工作原理: 红色和紫色两种颗粒代表不同尺寸的两种高分子,蓝色月牙形颗粒代表色谱柱内的填料。通常色谱柱填料是经过设计的具有不同孔径的高分子凝胶珠。当红色和紫色的高分子进入色谱柱以后,以一定速度流动的流动相在不停地冲洗色谱柱的同时,带动高分子颗粒在色谱柱内的移动。当高分子与凝胶珠填料接触时,尺寸大的高分子不能进入凝胶珠填料的孔,如图三中红色的大分子。所以红色的大分子在流动相的冲洗下先流出色谱柱。而紫色的尺寸较小的高分子可以进入凝胶填料珠的小孔,好像暂时被填料保留住了一样,最后由于流动相不停的冲洗,紫色高分子也会流出色谱柱,但是流出的时间较红色分子长了很多。图三右下方给出红色高分子和紫色高分子的凝胶色谱图,横坐标为保留时间,可以看出红色高分子的保留时间明显小于紫色高分子,这说明红色高分子分子量较大,比紫色高分子先流出色谱柱。 色谱柱的工作原理告诉我们,尺寸排除色谱可以将尺寸不同的高分子按照保留时间分开。保留时间越小的高分子(也就是流经色谱柱需要时间越短的高分子)的分子量越大,相反,保留时间越大的高分子(也就是流经色谱柱需要时间越长的高分子)的分子量越小。
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