显微图库 | THUNDER技术图库 第三弹

 

将计算清晰度与宽场显微镜的速度、荧光信号灵敏度和易用性相结合,实时解码三维生物学*。

   

为了帮助您回答重要的科学问题,THUNDER技术消除了使用基于相机的荧光显微镜观察厚样品时产生的焦外模糊现象。THUNDER技术采用了我们全新的光电数字技术--Computational Clearing。因此,可以对多种三维样品(包括模式生物、组织切片和三维细胞培养物)进行高速、高质量成像。请看这些图片,了解THUNDER技术是如何帮助研究人员揭示样品深处最精细的结构细节的。


当您看到THUNDER技术实现的无雾图像质量后,请访问我们的产品页面了解更多信息。解THUNDER技术如何将Computational Clearing与宽场显微镜的速度、荧光信号灵敏度和易用性相结合,从而实时解码三维生物学*。(*符合 ISO/IEC 2382:2015 标准)

小鼠--THUNDER技术模式生物成像

 

在这只 E12-14 小鼠(wt 样本)中,神经丝被染成红色,以评估神经元的生长情况。该小鼠未进行清除。法国 IGBMC 图像中心 Yves Lutz 提供。


类器官--THUNDER技术-模式生物成像

 

直径约 150 µm 的类器官,安装在凹陷载玻片上。使用高分辨率物镜(FluoCombi III)通过THUNDER技术模型生物成像。图片由瑞士徕卡显微系统公司的 Heinrich Bürgers 拍摄。


果蝇大脑

THUNDER技术- 3D活细胞成像

果蝇大脑视频。瑞士伯尔尼细胞生物学研究所 Rohan Chippalkatti 提供。


蜜蜂腿 - THUNDER技术-模式生物成像

 

蜜蜂的腿。图片由德国徕卡显微系统公司的 André Quinkertz 博士拍摄。


浮游动物 - THUNDER技术

 

副纤毛虫是一种单细胞纤毛微生物,常见于池塘等死水中。图片由新加坡徕卡显微系统公司的 Adam Cliffe 拍摄。


小鼠肾脏切片 - THUNDER技术-3D组织成像

小鼠肾脏切片,含 Alexa Fluor™ 488 WGA、Alexa Fluor™ 568 磷脂色素和 DAPI。样品为美国马萨诸塞州沃尔瑟姆市赛默飞世尔科技公司生产的 FluoCells™ 制备的 3 号载玻片。


小鼠肾脏切片 - THUNDER技术-3D组织成像

 

小鼠肾脏切片,含 Alexa Fluor™ 488 WGA、Alexa Fluor™ 568 磷脂色素和 DAPI。样品为美国马萨诸塞州沃尔瑟姆市赛默飞世尔科技公司生产的 FluoCells™ 制备的 3 号载玻片。


平滑肌 - THUNDER技术-模式生物成像

 

小鼠肺部 300 微米切片中血管周围的平滑肌。1x 物镜。

德国吉森大学 Mario Boehm 博士提供


原代培养,大鼠

THUNDER Imager 3D 细胞培养仪

 

大鼠原代细胞培养物;Cy5(品红色):β-III微管蛋白;Rhod(红色):NG2蛋白,GFP(绿色):Nestin蛋白;DAPI(蓝色):细胞核。图片由美国徕卡显微系统公司的 Louise Bertrand 拍摄。


小鼠肾脏切片 - THUNDER技术-3D组织成像

 

小鼠肾脏切片,含 Alexa Fluor™ 488 WGA、Alexa Fluor™ 568 磷脂色素和 DAPI。样品为美国马萨诸塞州沃尔瑟姆市赛默飞世尔科技公司生产的 FluoCells™ 制备的 3 号载玻片。


斑马鱼心脏 - THUNDER技术组织成像

 

斑马鱼心脏,DAPI(细胞核,蓝色)、肌球蛋白(心肌细胞,红色)和 GFP(原始心脏层,绿色)。瑞士弗里堡大学 Anna Jazwinska 提供。


斑马鱼胚胎 - THUNDER技术-模式生物成像

斑马鱼胚胎 6 dpf,HPCs 稳定表达 mCherry,VEC 稳定表达 GFP。

由中国闽南师范大学薛宇博士提供。


C2C12 细胞

THUNDER Imager 3D活细胞和3D细胞培养仪

 

C2C12 细胞生长并迁移到 transwell 膜的两侧,然后用层粘蛋白 B(品红色)染色以显示核结构,用 Hoechst(蓝色)染色以显示 DNA,用 γH2AX(黄色)染色以显示 DNA 损伤。使用THUNDER技术3D活细胞和 63X/1.4 油浸物镜对细胞进行成像。上面的图像是 17.47 微米厚 Z 叠的扩展景深投影。左图为原始外荧光数据,右图为经过 LVCC 处理的THUNDER图像。

图片由美国加州大学戴维斯分校生物科学院神经生物学、生理学和行为系 Lucas Smith 博士提供。


病毒标记神经元 - THUNDER技术-模式生物成像

 

病毒标记的神经元(红色)和星形胶质细胞(绿色)在人诱导多能干细胞衍生的皮质球体内。THUNDER技术模式生物配有 3.4 倍变焦的 2x 0.15 NA 物镜,用于生成这张 425 µm Z 堆栈(26 个位置),在此作为扩展景深 (EDoF) 投影展示。

图片由美国加利福尼亚州 Sergiu Pasca 博士实验室的 Fikri Birey 博士提供。


转基因果蝇眼睛感光器

THUNDER技术-3D细胞培养

转基因果蝇的眼部感光器,其横纹肌上有 EGFP 标记,受犀牛蛋白 1 启动子(ninaE-EGFP)控制。

美国加利福尼亚州南旧金山基因泰克公司 Navid Nouri 提供。


耳蜗细胞 - THUNDER技术-3D组织成像

 

孵化后第 7 天的鸡耳蜗细胞。80 微米振镜切片,肌球蛋白 7a - 感觉毛细胞,Sox2 - 支持细胞。

图片由美国加利福尼亚州 Amanda Janesick 提供。


神经肌肉接头 - THUNDER技术-3D组织成像

 

通过免疫染色神经丝蛋白和β-Bungarotoxin观察神经肌肉接头。图片由美国加利福尼亚州的 Andrea Yung 提供。


海葵息肉(Exaiptasia pallida)

THUNDER技术模式生物

 

海葵息肉(Exaiptasia pallida)在THUNDER技术模式生物下的 RFP 和 GFP 荧光通道。海葵的胃皮细胞中寄生着双鞭毛藻,由于其叶绿素自发荧光,在 RFP 通道中可以看到这些双鞭毛藻。海葵本身在口腔周围和一些触手周围显示绿色荧光带。

图片由美国加利福尼亚州 Christian Renicke 提供。


小鼠肺 - THUNDER技术组织成像

 

小鼠肺部,用 FITC、Cy3、Alexa 633 染色,使用 20 倍物镜和扩展景深 (EDOF) 拍摄。

图片由美国加利福尼亚州 Ross Metzger 提供。


显示淀粉样斑块的海马体

THUNDER Imager 3D 细胞培养仪

 

小鼠海马的纵向脑切片,显示淀粉样蛋白斑块(绿色,用 6E10 抗体染色,抗β淀粉样蛋白标记物;蓝色,DAPI(绿色,用 6E10 抗体染色,抗-β淀粉样蛋白的标记物),周围是小胶质细胞/小噬细胞(红色,用抗-Abi1 抗体染色;蓝色,DAPI)。

左图--原始数据与扩展景深投影;

右图--大体积Computational Clearing Z 叠加扩展景深投影。

图片由美国加利福尼亚州 Mehrdad Shamloo 教授提供。


神经嵴(NC)胚胎细胞群

THUNDER Imager 3D 细胞培养仪

 

上图是使用THUNDER技术 3D 细胞培养器,使用 1.3 NA 40x plan apo oil 物镜拍摄的。上图为原始宽场数据。下图是应用徕卡专有的小体积Computational Clearing (SVCC) 技术去除焦外模糊并更好地显示样本内部潜在结构后的结果。

图片由美国加利福尼亚州帕萨迪纳市加州理工学院布朗纳实验室 Michael Piacentino 提供。


成年小鼠卵巢

THUNDER技术 3D 细胞培养仪

将成年小鼠卵巢固定并用抗-NOBOX 染色,然后用改良 3DISCO 清除。将卵巢放入一个自制的孔中,孔底铺上盖玻片,然后在THUNDER 3D细胞培养成像系统上用 10X/0.32 物镜进行成像。

视频显示了合并的 4 层马赛克、586µm 厚的 Z 叠的三维投影,即原始外荧光图像和 LVCC 后的THUNDER处理图像。

视频由美国加州大学旧金山分校 Diana Laird 和 Bikem Soygur 博士提供


C.elegans - THUNDER技术模式生物

 

该菌株MAH215(Chang等人,Elife,2017)是一种双荧光mCherry::GFP::LGG-1蛋白,通过可视化自噬体(APs)以及自溶酶体(ALs)来监测秀丽隐杆线虫的自噬通量。

绿色点状物(GFP)是自噬体,而自噬体在酸性环境中会淬灭 GFP,只发出 mCherry 信号。

图片由美国宾夕法尼亚州匹兹堡大学 Aditi U. Gurkar 博士提供


肾脏切片 - THUNDER技术 3D 组织成像

 

肾脏,用 DAPI、WGA-FITC 和 Phalloidin-568 染色。z=20微米。图片由德国巴特诺海姆马克斯-普朗克心肺研究所 Kerstin Troidl 博士提供


视网膜切片 - THUNDER技术 3D 组织成像

 

视网膜切片,PECAM-488、AF-555 染色。z=30微米。图片由德国巴特诺海姆马克斯-普朗克心肺研究所 Kerstin Wilhelm 博士提供


心脏切片 - THUNDER技术 3D 组织成像

 

心脏切片 - THUNDER Imager 3D 组织。用 DAPI、αSMA-FITC 和 Vimentin-Cy3 染色的心脏切片。z=40µm。图片由德国巴特诺海姆马克斯-普朗克心肺研究所 André Schneider 博士提供


肝脏切片 - THUNDER技术-3D 组织成像

 

用 DAPI、SERVA、CD31-594 染色的肝脏切片。z=70µm。

图片由德国巴特诺海姆马克斯-普朗克心肺研究所 Remy Bonnavion 博士提供


脑切片 - THUNDER技术-3D 组织成像

 

用 DAPI、αGFAP-AF647 染色的脑切片。z=100µm。图片由德国巴特诺海姆马克斯-普朗克心肺研究所 Hong Xu 博士提供


小鼠视网膜 - THUNDER技术-3D细胞培养

 

固定小鼠视网膜并用以下试剂染色:抗 CD31 抗体(绿色):内皮细胞,IsoB4(红色):小胶质细胞抗 GFAP 抗体(蓝色):星形胶质细胞

样本由美国南旧金山基因泰克公司杰里米-伯顿(Jeremy Burton)博士和 Jiyeon Lee 博士提供。成像者:Olga Davydenko 博士(徕卡公司)


小鼠主动脉 - THUNDER技术-3D组织成像

 

红线--弹性层,绿色和红色--血管细胞,蓝色--DAPI,图片由美国加利福尼亚州 Ying Wang 提供

红线--弹性层,绿色和红色--血管细胞,蓝色--DAPI,用 LAS X 3D Viewer 显示。图片由美国加利福尼亚州 Ying Wang 提供


纤维 - THUNDER技术-3D细胞培养

 

纤维被荧光素标记。目的是研究动态和孔隙。55 幅图像的 Z 叠(130 微米)。图片由美国德克萨斯州休斯顿莱斯大学生物工程系 Mollie Smoak 提供


小鼠晶状体切片

THUNDER技术-3D细胞培养

 

本幻灯片是小鼠成人晶状体横切面,显示纤维晶状体细胞组织(绿色,用抗β-catenin 抗体(BDB610153)染色,这是一种膜蛋白)和 Afadin(红色,用抗Afadin(PA1-25076)染色,这是一种肌动蛋白丝结合蛋白,蓝色,Hoechst)。

图片由美国俄亥俄州立大学 Plagemen 实验室 Nathalie Houssin 博士提供


人肝祖细胞 (HPC)

THUNDER技术-3D组织成像

人肝祖细胞(HPC)在器官组织肝细胞中的扩增和分化。使用 HC PL Fluotar 40x/0.60 物镜拍摄的 Z 叠片总厚度为 85µm,共 123 个 Z 步。DAPI(白色):细胞核。Alexa488™(绿色):上皮细胞粘附分子(EpCAM)。PerCP-Cy5.5(红色):信号转换器 CD24。PE(蓝色):原蛋白-1(CD133)。

样本由英国诺丁汉大学 E131 Andy Bennett 实验室 Fatima Abukunna 博士提供。


小鼠肺 - THUNDER技术-3D细胞培养

为研究 I 型肺泡上皮细胞(AT1)生物学而染色的小鼠肺组织。黄色表示 AT1 细胞系痕迹(GFP),洋红色表示前糖化终产物受体(RAGE),青色表示水肿素 5(AQP5),灰色表示细胞核(DAPI)。图片由美国加利福尼亚州 Yana Kazadaeva 提供。


果蝇卵泡 - THUNDER技术-3D细胞培养

果蝇蓇葖果在THUNDER技术 3D 细胞培养上用 63X/1.4 油浸物镜成像。上面的视频是 27.5 微米厚的 Z 叠的三维最大投影。视频显示了原始外荧光数据和经过 LVCC 处理的THUNDER技术图像。

图片由美国加州大学伯克利分校 Mark Khoury 和 David Bilder 提供


盐水虾腿 - THUNDER技术-3D细胞培养

 

使用 Rhod、GFP 和 DAPI 滤光片采集的自发荧光。

使用 DMi8、HC PL APO 63x/1.40 Oil Objective 和 DFC9000 GT 摄像机采集图像。

图像大小为 2048 x 2048 像素,274 个 Z 截面。

图像由美国徕卡显微系统公司的 Louise Bertrand 拍摄。






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徕卡显微系统的历史最早可追溯到19世纪,作为德国著名的光学制造企业,徕卡显微成像系统拥有170余年显微镜生产历史,逐步发展成为显微成像系统行业的领先的厂商之一。徕卡显微成像系统一贯注重产品研发和最新技术应用,并保证产品质量一直走在显微镜制造行业的前列。


徕卡显微系统始终与科学界保持密切联系,不断推出为客户度身定制的显微解决方案。徕卡显微成像系统主要分为三个业务部门:生命科学与研究显微、工业显微与手术显微部门。徕卡在欧洲、亚洲与北美有7大产品研发中心与6大生产基地,在二十多个国家设有销售及服务分支机构,总部位于德国维兹拉(Wetzlar)。

   

     
     

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