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K5500微量分光光度计测定DS-DNA的浓度及纯度 用K5500微量分光光度计测量DS-DNA的浓度，评价DS-DNA的纯度。 实验原理：K5500微量分光光度计对DS-DNA进行紫外吸收扫描，给出扫描图；测量DS-DNA在260nm，280nm，230nm处的吸光值，由软件计算DS-DNA的浓度值，260nm与280nm处的吸光度的比值（A260/A280）及260nm与230nm处的吸光度的比值（A260/A230）来评价DS-DNA的纯度。多次测量，求测量的重复性。 样品：双链DNA（DS-DNA）样品 仪器：K5500微量分光光度计、移液枪 操作步骤： 空白对照 1 先用溶解核酸的溶剂作空白对照，以移液枪吸取溶剂（1～2µL）滴加到检测平台上。 2 放下取样臂。 3 点击软件界面上的“Blank”按钮，程序会自动记录空白值。 4用干净的吸水纸擦去上下检测平台上的溶剂。 样品测量 1 以移液枪吸取样品（1～2µL）滴加到检测平台上。 2 放下取样臂。 3 点击软件界面上的“Measure”按钮，即可得出样品参数（吸光度和浓度）和图表。 4 用干净的吸水纸擦去上下检测平台上的样品。 5 如需保存图表，可点击“Save Graph”按钮。 6 待全部样品测定结束后，点击“Show Report”按钮，已测样品的测定数据将出现在Excel表格中。 双链DNA的紫外吸收光谱图 得到双链DNA的紫外吸收光谱图如下： 双链DNA紫外吸收光谱图 样品在260nm处吸光度为3.5213Abs，浓度值为176.07ng/μL 黑色区域的波线图为双链DNA的吸收光谱图，在260nm处有最高吸收值，吸收值为3.5213（黄色框）。浓度值为176.07（绿色框），单位为ng/ul。260/280的比值为1.7749，用于评价核酸的纯度。 重复性：重复测量该样品5次，测得的浓度值分别为：176.07，174.56，177.42，175.43，176.10。 Δc＝max|ci－1 / 5 Σci | /（1 / 5 Σci ） = (177.42-175.92) / 175.92 = 0.85%
文献贡献者
山药的液相色谱法测定
高效液相色谱测定中药升麻中阿魏酸和异阿魏酸的含量
水产品中呋喃唑酮残留量的测定 高效液相色谱法
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