动物源性食品中多种β-受体激动剂残留量的测定—液相色谱串联质谱法(GB/T 22286-2008)—(瘦肉精)盐酸克伦特罗及莱克多巴胺的检测
试样中的残留物经酶解,用高氯酸调节pH值,沉淀蛋白后离心,上清液用异丙醇-乙酸乙酯提取,再用阳离子交换柱净化,液相色谱-串联质谱法测定,内标法定量。
该检测方法基本操作步骤如下:
称取2g混合均匀的样品与50mL离心管中,加入8mL乙酸钠缓冲液,充分混匀,再加入50µL β-葡萄糖醛苷酶/芳基硫酸酯酶,混匀后37℃水解12小时。添加100µL 10ng/mL的内标液与待测样品,振荡15min,5000r/min离心10min。取4mL 上清液加入0.1M 高氯酸溶液5mL,用浓高氯酸溶液调节pH到1±0.3。5000r/min离心10min,全部上清液转移到50mL离心管,用10M的氢氧化钠调节pH到11。加入10mL饱和氯化钠溶液和10mL异丙醇/乙酸乙酯(6:4)混合溶液提取,5000r/min离心10min。转移全部有机相,40℃水浴氮吹吹干。加入5mL 乙酸钠超声溶解。
MCX小柱用3mL甲醇和3mL去离子水活化,带5mL净化液上样,依此用2mL去离子水、2mL 2%甲酸水溶液和2mL甲醇洗涤柱子并抽干。2mL的5%氨水甲醇溶液洗脱收集。流速控制在0.5mL/min,洗脱液
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