睾丸激素水平通常使用自动化免疫分析仪进行测定,但这具有局限性。不过液相色谱 - 串联质谱(LC-MSMS)提供了选择性的准确替代方案,加利福尼亚大学圣地亚哥分校的高级实验室医学中心正在使用一种新型的提取技术以实现样品制备自动化。
自动化能够消除乏味的手动移液
加利福尼亚大学圣地亚哥分校高级实验室医学研究中心(UCSD-CALM)采用最先进的技术提供诊断医学和病理学服务,并开发新的治疗应用诊断测定。质谱(MS)是实验室的重要分析工具,但是开发和验证适合于临床环境的可靠且可重现的样品制备方法是一大挑战。毒理学实验室高级CLS专家Judy Stone解释说:“在MS领域我已经工作了25年,最初是使用气相色谱分析仪。目前的重点是LC-MSMS。这已经成为许多应用的首选技术,很多实验室正在开发并验证测试患者样本的新方法。”
Judy继续说道:“可靠、准确的结果也必须具有成本效益,才能用于患者护理。在材料方面,与自动化免疫分析仪相比,使用LC-MSMS可以降低睾酮等分析物的测量成本。然而,其弊端是LC-MSMS需要大量人工劳动,样品制备涉及大量的移液,并且总是存在样品混合的风险。此外,人工过程中还有人机工程学考量。在液体处理工作站上自动化样品制备可以有效解决这些问题。”
“如果使用更清洁的提取样品的话,不仅仪器维护较少,而且能减少意外停机和样品积压的风险。”
“我在另一个实验室工作时,Tecan推出了用于MS样品制备的AC Extraction Plate™。我试过后发现它使用起来非常简单; 我只需将样品手动吸取到微孔板中,然后使用现有的仪器参数,第一次使用就很成功,这让我印象非常深刻。但是,由于我们刚刚投入了大量的时间和资源来验证其他的样品制备方法,而且这个过程几乎完成,所以那个时候改变方向根本不现实。”
“当我搬到UCSD-CALM后,我尝试着和Tecan使用FreedomEVO®工作站和AC 提取板进行一些合作研究,从睾酮分析开始。大多数临床实验室利用自动化免疫测定仪器进行这些测试,对于具有正常睾酮水平的男性来说,其效果良好,但对于女性、儿童或低血清睾酮男性来说并不是最好的技术。LC-MSMS的精确度和选择性更好,但是使用手动移液难以制备大量可靠的样品。而且这个过程可能很繁琐,很难自动化,并且需要具备专业知识才能达到可接受的效果。相比之下,AC提取板非常简单,只需要一个微孔板振动筛就能精确移液,这一过程可由Freedom EVO重复执行。我们可以在液体处理平台上准备一批样品,只需15分钟的实际操作时间,从头到尾大约90分钟就能完成,大大节省了劳动时间。手动准备如果是小批量的话需要30分钟的实际操作时间,如果是大量样品的话需要两个半小时。使用AC提取板进行样品制备后的结果在验证过程中是可重复的,我们正在考虑是否有必要对每批样品按照全套的11个标准进行校准。如果每批只有两个标准——最高和最低浓度的校准器——或使用几个校准器更新的标准曲线,即可获得较好的结果,无疑这对实验室大有益处。我们正在对数据进行回顾性研究,看看这是否可行,目前来看还是非常有希望的。”
“最终,我们的目标是增加我们的测试菜单和单个测试每天执行的样品数量。我们已经利用质谱法进行25羟基维生素D测试,并计划将来对Freedom EVO手动移液进行自动化。同时我们还在开发一种用于1,25-二羟基维生素D的AC提取板法,这将具有挑战性,因为它大大低于25-羟基维生素D的水平。长期而言,对样品制备技术如AC提取板进行投资是有意义的,因为采用更清洁的提取样品,仪器维护时间减少,意外停机时间和样品积压也会减少。说到MS样品制备,我确信清理是值得的,”Judy最后总结道。
高级CLS专家Judy Stone
要了解更多关于Tecan的AC提取板,请访问www.tecan.com/acplate
要了解有关UCSDCALM的更多信息,请访问pathology.ucsd.edu / ucsd_center_for_advanced_ laboratory_medicine.htm
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