通过温度内标提高高分辨熔解曲线中纯合子检测的灵敏度

2010/12/14   下载量: 7

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应用高分辨率熔解曲线技术进行基因分型不仅简单而且有效。基于熔解曲线的分析方法中,探针法是进行基因分型的金标准,能够全面的检测匹配的目的等位基因。小片段扩增法是一种不需要设计探针进行基因分型的方法。由于异源双链的存在,杂合子很容易检测,而这很大程度上改变熔解转化的峰形。纯合子基因分型中G/C或A/T的改变是最难检测的,因为它们的等位基因有相似的Tm值。那些称为中性纯合子的碱基对使用小片段法是很难区分。此外,纯合子难区分也受样品与样品间温度的变化,缓冲液和体积的限制。无论多么精确的仪器,相关的变化可能是显著的,所以需要一种方法来减少这种变化并且改善小片段基因分型。而使用特异性内标就可以克服这些限制

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