方案摘要
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出于功能的需要,许多蛋白质在转录后翻译或翻译后会在氨基酸肽链上共价结合各种非肽类基团,形成翻译后修饰,常见的如:磷酸化、乙酰化、甲基化、糖基化和泛素化等修饰,其中研究最为详细的是蛋白质磷酸化。据统计,哺乳动物细胞内有1/3以上的蛋白质可以被磷酸化,而脊椎动物基因组中有2%的基因编码蛋白激酶或磷酸酶。蛋白质磷酸化参与调节细胞多种生命活动过程,包括细胞的增殖、发育和分化、细胞骨架调控、细胞凋亡、神经活动、肌肉收缩、新陈代谢,肿瘤发生等。磷酸化蛋白及其位点的鉴定对更好地理解机体内一些受磷酸化影响的信号通路机制是十分必要的。 生物体内磷酸化与去磷酸化处于一个可逆的动态变化过程,在蛋白质的磷酸化及去磷酸化的过程中,通过磷酸化蛋白的总量及不同位点的精细磷酸化调控,在细胞膜及细胞水平上触发很多的信号调控过程,并引起一系列细胞内事件的发生,如细胞增殖、分化及凋亡等。因此细胞水平的磷酸化检测可能比体外的磷酸化检测更为重要,可以助我们更好地理解磷酸化及信号调控过程,以及所引起的生物学效应。目前磷酸化蛋白的研究已经成为功能蛋白质组学研究的热点。
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