资料摘要
资料下载本文综述了国内外关于血浆人血清白蛋白(pHSA)和基因重组人血清白蛋白(rHSA)分离纯化的进展和发展趋势。以冷乙醇沉淀为主的 pHSA 分离方法仍是目前多数工业采用的工艺, 但近年来发展的离子交换色谱、凝胶过滤色谱、亲和色谱等多种色谱分离技术具有自动化程度高、生产周期短、更符合 GMP 等特点, 正在逐步取代传统的冷乙醇沉淀法。 当前用基因工程技术表达的人血清白蛋白对分离纯化提出了新的挑战。 为获得高纯度、安全、稳定的产品, 各种色谱分离技术得到更多的应用, 其中扩张床离子交换色谱可以省去离心、过滤等传统固液分离操作。 尽管 rHSA 的纯化技术已有一定的发展, 但纯化过程仍需进一步优化以提高产品纯度及收率。
文献贡献者
上海闪谱-蛋白纯化系统-组氨酸标签蛋白纯化介质的合成及其分离纯化
简介：蛋白质的分离纯化是发展蛋白组学，研究蛋白质结构功能与应用的前提和基础。 本文研发了一种基于亲和性离子液体（AIL）/离子液体（IL）的组氨酸标签蛋白的纯化体系，经螯合金属离子（Cu2+、Zn2+、Ni2+）后应用于从大肠杆菌细胞裂解物中纯化组氨酸标签增强型绿色荧光蛋白。 结果表明：Cu2+-AIL/IL 对目标蛋白的亲和性能最高， 为 62%， 然而含有较多的杂蛋白成分；Zn2+-AIL/IL 的亲和效率约为 51%， 且纯化后目标蛋白的纯度高达90%，Ni2+-AIL/IL 的亲和能力最弱。 进一步将 Zn2+-AIL/IL 体系应用于直接纯化大肠杆菌中表达的组氨酸标签青霉素结合蛋白的细菌裂解液，所得目标蛋白纯度高达 95%。 这种方法为新型组氨酸标签蛋白纯化介质，从基础 研究拓展到产业化应用提供了理论依据，并可望将此类新型亲和介质应用到其它蛋白质的分离纯化。
上海闪谱-蛋白纯化系统-重组人促红细胞生成素纯化的研究进展
简介：促红素能促进人前体红细胞的增殖和分化，从而使人体内红细胞数量增加。临床上主要用于贫血、组织断离以及癌症患者透析后的恢复。促红细胞生成素自1971年在羊的尿液中被提取出后，近30年以来人们不断对其进行研究。促红素蛋白纯化工艺从Myake的七步法完善到现在的三步纯化法。本文综述了促红细胞生出素蛋白纯化的发展历史以及促红素未来的发展方向。
上海闪谱-蛋白纯化系统-重组人IL_31蛋白纯化方法的比较研究
简介：目的 比较两种方法纯化 rhIL-31 的效果。方法 将含 pET32a/rhIL-31 的重组菌 E.coli.BL21(DE3)经 IPTG诱导表达,通过超声波破碎,包涵体的提取溶解,分别经G75凝胶层析和镍琼脂糖凝胶FF层析进行蛋白纯化,通过SDS-PAGE对纯化结果进行比较分析。结果 镍琼脂糖凝胶 FF 层析法的杂蛋白去除率高于凝胶层析法,所得蛋白纯度略高。结论 比较重组人 IL-31 蛋白的纯化效果,镍琼脂糖凝胶FF层析的效果比G75凝胶层析的效果好。
上海闪谱-蛋白纯化系统-重组蛋白纯化研究进展
简介：随着基因工程技术的快速发展，重组蛋白表达技术越来越成熟，然而重组蛋白的分离纯化技术相对落后限制了重组蛋白的应用。本文着重介绍了目前重组蛋白分离纯化的主要技术及其特点和应用范围。
上海闪谱-蛋白纯化系统-藻蓝蛋白纯化的研究进展
简介：文章综述了几种传统的分离纯化藻蓝蛋白的方法。重点介绍了双水相萃取法，分析了双水相萃取技术分离提纯藻蓝蛋白的优缺点，讨论了双水相萃取技术应用的技术难点和研究前景，同时阐明了双水相萃取技术的发展对分离纯化藻蓝蛋白具有重要意义。
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