方案摘要
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1、抗原: 蛋白质、多肽、细胞器、细胞、组织等。 2、免疫方式:皮下注射、腹腔注射、静脉注射、肌肉注射等。 3、不同动物免疫所需抗原量(以蛋白免疫为例) 动物 抗原量 兔子 20-200ug 小鼠 2-40ug 大鼠 10-50ug 绵羊 100-1000ug 母鸡 20-200ug 单位:微克 4、免疫方案(以免疫兔子为例): 天数 0 14 28 38 56 66 87 注射 x x x x 采血 2ml 2ml 2+20ml 2+50-70ml 5、注意: 1)第一次免疫用完全佐剂与免疫原混合,以后加强免疫用不完全佐剂与免疫原混合,采取多点,时间间隔式免疫法。 2) 如果用细胞免疫兔子,那么每次免疫所需细胞量为2-3 x 107 cells. 3) 在连续免疫完三次后,需要少量取血进行ELISA检测,检测所免疫动物的抗体滴度,一般滴度能达到1:10,000-50,000.在处死所免疫的动物前一周应加强一次免疫。 4) 如果用小鼠免疫,可以尾静脉小量采血(大约50μl),最后取眼球大量采血(大约500-1000μl);如果用兔子免疫,可以耳缘静脉小量取血(大约2mL),最后心脏大量取血(50-100mL) 5) 按血清制备的标准方法将血清分离,并且分装成小份,储藏在-80oC.
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