可溶性IL-6Rβ亚基突变体在CHO细胞中的表达及活性研究

2012/09/19   下载量： 1 次

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弄清只含白细胞介素6（IL-6）受体β亚基(gp130)胞外第二、三个FNⅢ区的可溶性突变体是否能拮抗IL-6的生物学效应。方法　首先用重叠延伸PCR方法扩增出gp130突变体cDNA；接着将其克隆到真核表达载体pSVL中；用脂质体转染法将此表达载体导入CHO细胞中，通过点杂交和反转录PCR证明其得到有效表达；用MTT法在杂交瘤细胞和白血病细胞中观察了此突变体对IL-6生物学效应的影响。结果　发现此突变体的表达上清具有拮抗IL-6所致的杂交瘤细胞7TD1增殖及白血病细胞R2生长抑制的作用。结论　gp130胞外第二、三个FNⅢ区中含有与IL-6/IL-6Rα形成复合物的部位。此结果为深入研究gp130胞外区的结构与功能以及针对gp130胞外区的小分子激动剂和拮抗剂的设计提供了一些依据。

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