供货周期: | 现货 |
品牌: | 东西仪 |
规格: | |
货号: | wi95730 |
CAS号: |
产品名称: 科研用碱性磷酸酶试剂盒
产品货号: wi95730
产 地: 国产
测定意义: AKP/ALP是一种含锌的糖蛋白,在碱性环境中可水解各种天然及人工合成的磷脂单酯化合物。AKP/ALP广泛分布于人体各脏器中,以肝脏为主。肝硬化、肝癌、肝炎、佝偻病、软骨病等均可引起AKP/ALP的升高,因此AKP/ALP常用于阻塞性黄疸、原发性肝癌等疾病的检查。测定原理:在碱性环境中,AKP/ALP催化磷酸苯二钠水解生成游离酚和磷酸氢二钠,酚在碱性溶液中与4-氨基安替比林作用,经铁氰化钾氧化生成红色亚醌衍生物,在510nm有特征光吸收。需自备的仪器和用品:可见分光光度计、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、1mL玻璃比色皿和蒸馏水。试剂组成和配制:试剂一:液体,50mL×1瓶,4℃保存;试剂二:液体,10ml×1瓶,4℃保存;试剂三:液体,10mL×1瓶,4℃避光保存;试剂四:液体,30mL×1瓶,4℃避光保存,未变成蓝绿色之前均可使用;标准品:液体,1mL×1支,1mg/ml酚标准液。临用前用双蒸水稀释5倍,即为0.2mg/ml标准液。粗酶液提取:准确称取约0.1g组织,加试剂一1ml充分研磨,4℃、10000rpm离心10min,取上清待测。血液可直接用于测定,如果浓度高的话,用试剂一稀释。测定步骤:按下表操作:(其中标准管和空白管只需做一次测定,测定管和对照管每个样均需做)充分混匀,用双蒸水调零,迅速于510nm处检测各管的吸光值。AKP/ALP活性计算:1、 组织中AKP/ALP活力计算AKP/ALP活力单位定义:每毫克蛋白每15min产生1mg酚定义为一个活力单位。AKP/ALP(U/mgprot)=0.2×(OD测定管-OD对照管)÷(OD标准管-OD空白管)÷蛋白浓度(mg/ml)2、 血液中AKP/ALP活力计算AKP/ALP活力单位定义:每100ml血液,每15min产生1mg酚定义为一个活力单位。AKP/ALP活力(U/100ml)= 0.2×(OD测定管-OD对照管)÷(OD标准管-OD空白管)×100= 20×(OD测定管-OD对照管)÷(OD标准管-OD空白管)注意事项:1、 试剂二、试剂三和试剂四均需避光保存;2、 试剂四变蓝绿色后不能再使用;3、 加完试剂四充分混匀后,可用酶标仪进行测定;4、 加入试剂四后必须立即混匀,否则显色不完全。 规格:50管48样 注:图片仅供参考
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