石蜡切片(paraffin section)是组织学常规制片技术中应用最为广泛的方法。石蜡切片不仅用于观察正常细胞组织的形态结构,也是病理学和法医学等学科用以研究、观察及判断细胞组织的形态变化的主要方法,所以广泛地适用于许多学科领域的研究中。
活的细胞或组织多为无色透明,各种组织间和细胞内各种结构之间均缺乏反差,在一般光镜下不易区分;组织离开机体后很快就会死亡和产生组织腐败,失去原有正常结构,因此,组织要经固定、石蜡包埋、切片及染色等步骤制成片子,才能在镜下清晰辨认其形态结构。
石蜡切片法包括取材、固定、洗涤和脱水、透明、浸蜡、包埋、切片与贴片、脱蜡、染色、脱水、透明、封片等繁多步骤;其中切片是决定片子质量好坏的最重要的环节之一。因而影响石蜡切片的因素比较多,本期文章我们归纳了常见切片问题有哪些,以及该如何进行补救。
1、刀口锋利不一,局部产生差异导致。
优化措施:可移动刀片,改用新刀口。
2、发现切片刀未覆盖到整个蜡块。
优化措施:调整刀口位置至刀片能切到整个蜡块。
3、如果蜡块左右硬度不一致。
优化措施:尽量使用锋利的新刀口,减轻干扰。
4、如果组织未居蜡块正中央。
优化措施:用刀片切去部分石蜡,使组织居中或重新包埋。
1、如果空气干燥。
优化措施:通过加湿器;哈气解决。
2、切片机回缩功能未开启?
优化措施:开启回缩功能。
3、材料边缘留蜡太少?
优化措施:重新包埋,注意组织尽量在正中央。
4、刀的角度不合适?
优化措施:调整余隙角/倾角。
1、蜡块冷冻过度?
优化措施:适度升温,用毛笔将蜡片摊开压住,切2至3片即成带。
2、石蜡过硬?
优化措施:加软蜡。
3、刀口太钝?
优化措施:换新刀口。
4、刀的倾角太大?
优化措施:减小倾角。
1、蜡块温度偏高?
优化措施:适度降温。
2、石蜡过软?
优化措施:加强冷冻。
3、刀口上留有一层石蜡?
优化措施:清扫刀片,刀片刮蜡,二甲/苯擦拭刀口。
4、刀口钝?
优化措施:换新刀口。
5、含脂肪多?
优化措施:前期脱脂处理,包埋挤压脂肪。
1、刀有缺口?
优化措施:移动刀口。
2、石蜡中含有杂质?
优化措施:清除杂质,更换高质量石蜡。
3、刀口留有碎屑或细丝?
优化措施:清洁刀口。
4、组织太硬?
优化措施:蜡块入水浸泡软化。
5、组织内有止血钉?
优化措施:抠出止血钉。
1、锁杆或零件松动?
优化措施:拧紧锁杆或零件。
2、刀口倾角偏大?
优化措施:适度减小倾角。
3、标本伸出太长?
优化措施:适度回缩,前移刀架。
4、蜡块没夹紧?
优化措施:清洁蜡块,夹头。
5、组织偏硬?
优化措施:表面脱钙,缓慢切片。
6、切片机内部磨损?
优化措施:维护更换新机。
1、切片机磨损?
优化措施:维护或更换切片机。
2、用力不当?
优化措施:调整用力。
3、锁杆或零件松动?
优化措施:拧紧锁杆或零件。
4、蜡块过硬?
优化措施:将石蜡块浸泡在水中。
5、温度变化?
优化措施:重新冷冻蜡块。
1、脱水处理不当?
优化措施:重新脱水。
2、有透明剂残留?
优化措施:增加浸蜡时间,重新包埋。
3、由于脱水机和透明剂的影响,使组织变硬发脆?
优化措施:调整脱水程序。
4、材料太硬或太大?
优化措施:脱钙,分开包埋。
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