荧光偶极子的取向分布和摆动角度对细胞的结构和状态具有重要影响,但由于宽场显微镜的光学切片能力差,偏振调制信号容易受到相邻荧光团的干扰。
本文提出了一种利用偏振结构照明实现光学切片的偏振调制成像方法,并结合双色比率成像测量极性脂质。结果显示,该方法显著提升了偶极子取向和摆动测量的精度。与传统的共聚焦偏振成像相比,这种方法的成像速度提高了一个数量级,能够捕捉到活细胞亚细胞结构的快速动态变化。
图1 OS-PM跟踪活细胞中脂质膜的快速动态变化。(a) 用尼罗红标记的不同亚细胞结构的成像结果,速度为30 f.p.s。宽场(左)、宽场偏振调制(中)和光学切片偏振调制(右)。(b) (a) 中的放大图像和延时图像,比例尺:2μm。
双色光学切片偏振调制(OS-PM)技术能够快速、准确地对极性和非极性脂质膜的脂质顺序进行成像,这对于研究脂质流动性至关重要。鑫图Dhyana 400BSI相机采用背照式sCMOS芯片技术,具有高灵敏、高速和高动态成像优势,不仅可以快速检测微弱的荧光信号,减少光毒性和光漂白,还能快速捕捉活细胞动态变化过程,提高测量精度和成像效率。
参考文献
Zhanghao K, Liu W, Li M, et al. Fast, Accurate Polarization and Polarity Imaging with Polarized Structured Illumination[J]. bioRxiv, 2019: 640268.
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