肉制品中瘦肉精液相色谱检测方法

2015-01-13 14:32  下载量:19

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盐酸克仑特罗又称“瘦肉精”,是一种肾上腺类神经兴奋剂。可明显促进动物生长,并增加瘦肉率。它能够改变动物体内的代谢途径,促进肌肉,特别是骨骼肌中蛋白质的合成,抑制脂肪的合成,从而加快生长速度,瘦肉相对增加,改善肉体品质。很快瘦肉精就被运用于饲料中,促使猪等畜禽生长速率、饲料转化率、胴体瘦肉率提高10%以上,所以盐酸克仑特罗在作为饲料添加剂销售时的商品名又称为“瘦肉精”、“肉多素”等。人体食用瘦肉精会出现急性中毒、甲状腺功能亢进、导致心律失常、过敏等现象。 早在2002年9月10,在中国境内就禁止在饲料和动物饮用水中使用盐酸克伦特罗。尽管盐酸克伦特罗的使用已明令禁止,但仍有不法经营户违法使用。因此,相关检测部门也加大监测力度。胶体金快检卡是最简单也是最常用的瘦肉精检测工具,由于检测准确性较低,仅用于大量筛查检测,进一步确证还需使用高效液相色谱法。使用高效液相色谱仪检测肉制品中瘦肉精残留的方法专属性好、选择性强、检测精确度较高,而且假阳性率低。 液相色谱仪适合测定热不稳定和强极性的β-激动剂及其代谢产物,而且HPLC可以与柱前提取、纯化及柱后荧光衍生化反应和质谱(MS)等系统联用,容易实现分析过程的自动化。肉制品中瘦肉精残留液相色谱检测方法及步骤如下: 检测仪器:高效液相色谱仪(配备恒流泵、紫外检测器、六通进样阀、色谱工作站)、固相萃取仪、氮吹仪、柱温箱      检测试剂:乙醚、正己烷(分析纯)、甲醇(色谱纯)、盐酸溶液、乙酸缓冲液 、NaOH溶液、甲醇液、盐酸克伦特罗标准液      样品制备:提取和净化取猪肉样品10g,加入30ml lmol/L盐酸溶液匀浆,超声波振荡3h,5000r/mln的速度离心10min,取上清液用lmol/L NaOH溶液滴至碱性,乙醚或正已烷抽3次,抽提液在氮吹仪上蒸发至5ml后上固相萃取小柱,以除去大部分杂质;洗脱液上固相萃取小柱,将待测成分吸附在小柱上,用0.05mol几乙酸缓冲液(pH7.0)洗涤小柱3次,0.3mol/L乙酸缓冲液洗脱待测成分,冷冻干燥,用0.5ml甲醇液溶解后取100uL供高效液相色谱仪检测。       色谱条件 色谱柱:C18柱(250mmX4.6mm ) 流动相:甲醇—水(75 25) 流速:0.65ml/min    检测波长:243nm    进样量:100uL    柱温:室温30℃      检测结论:本方法在猪的肌肉和肝脏组织中的检测限为0.001ug/g’回收率范围为80%±20%。 本文地址:www.hxsj17.com

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