方案摘要
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答：下列原则供您参考。 ◆TaqMan 探针位置尽可能靠近扩增引物（扩增产物50-150bp），但不能与引物重叠。 ◆长度一般为18-40mer 。 ◆G-C含量控制在40-80%左右。 ◆避免连续相同碱基的出现，特别是要避免GGGG或更多G出现。 ◆在引物的5’端避免使用G。 ◆选用比较多的碱基C。 ◆退火温度Tm控制在 68-70C左右。
文献贡献者
凝胶成像系统的各种光源
PCR仪的热盖位置及其对实验的影响
Westernblot 检测化学发光成像的特点
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