化合物的合成、纯化和最终确认始终面临挑战。从确保产品的成功合成,到建立Flash纯化方法,再到最终确认馏分的ID,漫长的工作流程可能耗时且重复。AIS通过建立一种全新的工作流程,可以快速轻松地实现从反应监测到Flash纯化和馏分ID确认的过程,重点步骤包括:
步骤1:使用AIS Plate Express TLC薄层色谱质谱接口和expression CMS小型台式质谱仪监测Suzuki反应,然后进行TLC/CMS分析。
步骤2:TLC到Flash,通过自动从手机TLC板图像开发的方法,使用Interchim puriFlash XS520 Flash Chromatography Genius®系统纯化化合物。
步骤3:通过CMS和ASAP,30s内鉴定馏分ID。
实验仪器
表1 实验仪器及条件
图1 样品混合物,包括分子量、结构和反应量
实验方法
步骤1:用薄层色谱监测反应
溴代苯胺和苯硼酸在乙醇中用钯催化剂(图1)在室温下反应2小时。2小时后,取样品在 TLC 板上点样,并在二氯甲烷和环己烷溶剂中展开。然后通过 TLC / CMS 监测反应-Plate Express TLC 与 expression® CMS 小型台式质谱仪联用,从 TLC 板中直接获取质谱信息来识别样品(图2)。
图2 将爬板后的TLC斑点对准红色激光点。按下按钮,TLC开始提取样品,输送到质谱仪进行检测,质谱信息如上图所示。
步骤2:TLC 到 Flash:方法转化
通过手机端应用程序—实现 TLC 到 Flash方法转换,将薄层色谱分离信息上传至 Flash 系统中,为馏分收集提供最佳的分离条件。puriFlash® 系统进行纯化。
对薄层色谱板进行拍照。输入标题等详细信息、标记溶剂前沿和感兴趣的产品、纯化量(400mg)和所用溶剂(环己烷:10%和二氯甲烷:90%)。数据通过蓝牙发送到 puriFlash® 系统,Genius 软件自动帮助构建方法。
Genius软件上显示的TLC数据,系统根据TLC数据推荐最佳的梯度纯化方法。完成运行后的TLC板和总UV曲线。屏幕显示运行后的总UV谱图(图6),使用触摸屏功能,可以找到馏分中峰的位置,以便下一步进行馏分确认分析。
图3 完成运行后的TLC板和总UV曲线。屏幕显示运行后的总UV谱图,使用触摸屏功能,可以找到馏分中峰的位置,以便下一步进行馏分确认分析。
步骤3:馏分 ID <30 秒即可获取
通过 UV 收集馏分,需要确认馏分 ID 以确保目标物已被洗脱,可以蘸取每个化合物的馏分,通过 ASAP/CMS 进行分析。
通过 ASAP 和 expression® CMS进行馏分确认,只需将探头浸入馏分收集管中蘸取样品,再将其直接插入质谱中,30S 内即可获得结果,与预期的结果一致。
图4 将大气固体分析探头(ASAP)浸入其中一个已识别的馏分收集管中,然后插入到质谱仪进行分析。
总结
Flash智能纯化、expression® CMS、TLC 薄层色谱质谱接口和 ASAP 直接进样分析探头相结合,通过简单的取样技术,直观的软件,和先进的检测技术简化工作流程,您可以轻松和自信的合成、鉴定和纯化您的化合物。通过一个直观的工作流程,可确保:
• 使用 TLC 和expression® CMS 鉴定感兴趣的薄层色谱斑点并用于纯化;
• 通过 puriFlash® 纯化系统和 Genius 软件建立优化的方法;
• 用 ASAP 直接进样分析探头和 expression® CMS小型台式质谱仪进行馏分确认。
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